細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)
種屬：Bacillus cereus

模式：菌株未知

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
EGFL7 Protein Mouse 重組小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標(biāo)簽)醋酸艾塞那肽質(zhì)量規(guī)格：度98%以上Exenatide Acetate/Exendin-4

TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 *微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)非那雄胺質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRFinasteride

大鼠海馬神經(jīng)元RN-h依諾沙星(水溶性）質(zhì)量規(guī)格：依諾沙星含量≥60%Enoxacin

TAOK3 Others Human 人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 (aa 1-411) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氧氟沙星質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ofloxacin

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7氧氟沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ofloxacin
Hep 3B(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27，人，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

AGRP Others Human 人 AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27（6-27），人，雞，小鼠，豬，大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人角膜上皮細(xì)胞HCEpiC垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38（16-38），人，雞，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽（1-29），大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

HMy2.CIR 人 B 母細(xì)胞胰多肽，人Pancreatic Polypeptide,human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細(xì)胞2′-脫氧肌苷-5′-單嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量：RT1克

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3DL-3-醇 3-Pyrrolidinol 40499-83-0

CNE1, 人細(xì)胞系1，6-己二醇shēng huà shì jì容量：100克

人纖維細(xì)胞;HT-1080 大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLMaltose飴糖100U高，98%

腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1634-04-4甲基叔丁基tert-Butylmetxyl
蠟狀芽孢桿菌培養(yǎng)CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)硫酸長(zhǎng)春新堿/硫酸醛基長(zhǎng)春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Vincristine Sulfate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

THP-1(人髓系單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠成肌細(xì)胞;C2C12帕唑帕尼Pazopanib質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人小梁網(wǎng)細(xì)胞裂解物HTMCL非洛地平/非氯地平Felodipine質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP30,BR

AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 非洛地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Felodipine質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA3176-硫鳥嘌呤(進(jìn)分)6-TG/Thioguanine質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分,Sigma A4882