細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株培養(yǎng)
種屬：CHO-K1

類型：貼壁生長

形態(tài)：CM7-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細(xì)胞，短梭形

分離基物：中國倉鼠，雌，卵巢

提供形式：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

傳代方法：將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM7-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件：37℃，5%CO2，CM7-1培養(yǎng)液。CM7-1培養(yǎng)液：90%F-12K+10%FBS。F-12K：F-12K培養(yǎng)液。

存儲條件：凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
貂源細(xì)胞對茴香酸(>99.0%(GC)(T))p-Anisic Acid質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)(T)

APOA1 Others Mouse 小鼠 APOA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))9-Anthracenecarboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)

透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL佐匹*(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

CHO-K1-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) hamster ovary cell subline F-12K+10% Hyclone FBS阿尼西坦，回拉西坦;茴拉西坦質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRAniracetam

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Ierleukin-9 蛋白 (His 標(biāo)簽)阿尼西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aniracetam
IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 伏立諾他雜質(zhì)質(zhì)量規(guī)格：>98%Vorinostat impurity

MA891瘤 癌當(dāng)藥醇苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Swertianolin

BT-549人管癌細(xì)胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS皂素(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分，≥10 % saponin

VSTM1 Protein Human 重組人 VSTM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)苦豆堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,BRAloperine

人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 人肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸普拉格雷質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Prasugrel
NCI-N87 人高分化細(xì)胞α-淀粉酶(枯草桿菌)5克

RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞2,7-二羌基-9-芴同 2,7-Dixy7noxy-9-fluorqnonq 423-9-2

人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝羧肽酶B(豬胰)1公斤

人胚胎，皮膚，肌肉;M-7 人臍帶單核細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-甲氧基本酸25克RT，避光

人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF626-05-12,6-二溴2,6-Dibromopyridine
中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株培養(yǎng)人眼球脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞HOCF毛地黃毒苷配基Digitoxigenin質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(LC),原裝進(jìn)口

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 柯諾辛堿Corynoxine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1烏拉地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Urapidil質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

NCI-H1975細(xì)胞，人非小細(xì)胞 鼠肝星形細(xì)胞,HSC-T6細(xì)胞 CM-R047大鼠腸微細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL夫西地酸鈉Fusidate 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

RBE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2夫西地酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Fusidate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品