TNM-FH（含血清）培養(yǎng)基：培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　TNM-FH（含血清）培養(yǎng)基：培養(yǎng)
提供形式：500ml

模式：菌株未知
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是TNM-FH（含血清）培養(yǎng)基：培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2雷洛昔芬-d4Raloxifene-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

CPE Others Human 人 CPE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸Raloxifene 6-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

多聚賴氨酸10 mg/mlPLL(+)-兒茶素水合物(+)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分

CRELD2 Others Mouse 小鼠 CRELD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (+)-兒茶素水合物（標(biāo)準(zhǔn)品）(+)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2(+)-兒茶素（標(biāo)準(zhǔn)品）(+)-Catechin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
IL10RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL10RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 精胺四鹽酸鹽;鹽酸精胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)Spermine tetra

人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMCD-熒光素鉀鹽，D-蟲熒光素鉀鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Luciferin potassium

RWPE2細(xì)胞，人上皮細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系,N/N1003A(RLE)細(xì)胞 小鼠心肌細(xì)胞MCM多尼培南質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一水合物Doripenem

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸多沙普侖質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP31,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Doxapram

ACHN(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R043大鼠小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1鹽酸多沙普侖（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Doxapram
細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLO-去甲基加蘭他敏質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口O-Desmethyl Galanthamine

CFSC-2G細(xì)胞，大鼠肝星形細(xì)胞 7721(7721細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6O-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide

EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)異吉非羅齊（吉非羅齊雜質(zhì)）質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)

Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細(xì)胞;L1210吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6

山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1N-去甲基昂丹司瓊質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Demethyl Ondansetron
TNM-FH（含血清）培養(yǎng)基：培養(yǎng)人臍內(nèi)皮細(xì)胞(人細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC阿莫西林-d4Amoxicillin-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

MME Others Cynomolgus 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿莫西林三水合物Amoxicillin trihydrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]二氫非諾貝特Dihydro Fenofibrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
收到TNM-FH（含血清）培養(yǎng)基：培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。