大鼠海綿體內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　大鼠海綿體內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)
模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

存儲條件：100ml
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是大鼠海綿體內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
非洲綠猴腎細胞;VERO E6α-促激素α-MSH質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(1-42),人β-Amyloid Peptide (1-42), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

HOS [Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34)酰胺 (牛)[Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

NCI-H460 [H460]人大細胞細胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素[Phe2,Orn8]-Oxytocin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標簽)[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素[Ser4,Ile8]-Oxytocin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標簽)天狼猩紅質(zhì)量規(guī)格：BSDirect red 80

人周邊細胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記) MouseDL-苯甘氨酸(>98%，BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCDL-alpha-Phenylglycine

CM-H081人主動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL丁草胺標準溶液(0.100mg/ml)質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/mlButachlor solution

IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 丁草胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,95%Butachlor

人成纖維細胞HLF丁草胺標準溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%Butachlor solution
SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì)H)質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)

軟骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口Losartan-d3

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進口Losartan Carboxylic Acid

615小鼠網(wǎng)織細胞性瘤株;L615洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國進口Losartan Carboxaldehyde

SK-LU-1細胞，人低分化 大鼠腎成纖微細胞,NRK-49F細胞 CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2MQAE(氯離子熒光探針)質(zhì)量規(guī)格：進分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
大鼠海綿體內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)人*腺泡上皮癌;HPAC滅草煙,咪唑煙酸Imazapyr acid質(zhì)量規(guī)格：>98%

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 咪唑煙酸(標準品)Imazapyr acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞石膽酸(標準品)Lithocholic Acid質(zhì)量規(guī)格：>97(GC),標準品

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 [CIP 104786]細胞 293 [HEK-293] (人胚腎細胞)氧嗪酸鉀Potassium Oxonate質(zhì)量規(guī)格：>98%

人T瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E氧嗪酸鉀(標準品)Potassium Oxonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品
收到大鼠海綿體內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。