細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
人細胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人細胞
種屬：KMBC

模式：菌株未知

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到人細胞 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人細胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)卡維地洛-甲基-d3Carvedilol-methyl-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口

Jurkat77細胞，人T瘤細胞Jurkat亞系 615小鼠株,Ca761細胞 牛腦垂體提取物BPE卡維地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers)Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers)質(zhì)量規(guī)格：美國進口

NCI-H358(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))(S)-(-)-2-Methyl-1-butanol質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

C2C12(小鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2 T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFP(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

非洲綠猴腎細胞;BS-C-1(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)
IL1A Protein Human 重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-N-beta-Trityl-L-asparagine

PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細胞株) 5×106cells/瓶×2 Lec1(卵巢細胞)N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天門冬酰胺 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OH

CL-0244WISH(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2Boc-L-天冬氨酸 4-芐酯 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-L-Asp(OBzl)-OH

SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細胞裂解液 (陽性對照) Boc-L-天冬氨酸 4-環(huán)己酯 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-L-Asp(OcHex)OH

人骨骼肌細胞cDNAHSkMC cDNABOC-β-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRBoc-?-Ala-OH
PLA2G2A Others Human 人 PLA2G2A / PLA2B 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-去甲氧基-4-氯代奧美拉唑硫化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole Sulfide

人十二脂腸腺癌;HuTu-804-去甲氧基-4-氯代奧美拉唑質(zhì)量規(guī)格：美國進口4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole

人骨髓間充質(zhì)干細胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105)外消旋4-去甲氧基-4-硝基奧美拉唑質(zhì)量規(guī)格：美國進口rac 4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole

CM-R032大鼠腸內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL奧美拉唑砜N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Omeprazole Sulfone N-Oxide

小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 小鼠肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL(R)-(-)-2-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(R)-(-)-2-Octanol
人細胞 人腎系膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL蒙脫石（標準品）Montmorillonit質(zhì)量規(guī)格：鑒別

BALB/3T3 clone A31細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 L1210(細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0901佛手柑素;香檸檬素;佛手柑亭;香檸檬亭（標準品）Bergamottin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽)鹽酸羅哌卡因（標準品）Ropivacaine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定

SiHa(人子宮頸鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 番石榴苷（標準品）Guaijaverin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

人羊膜細胞;WISH恩曲他濱（標準品）Emtricitabine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品