細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人小氣道上皮細(xì)胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人小氣道上皮細(xì)胞形態(tài)
種屬：HSAEpiC

類型：貼壁生長

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：1640+10%FBS（德國SERANA胎牛血清或GIBCO 16000-044胎牛血清）

傳代方法：1:2~1:4

存儲條件：90%FBS+10%DMSO

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人小氣道上皮細(xì)胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人小氣道上皮細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 大鼠肝細(xì)胞瘤，H-4-II-E細(xì)胞 RAW 264.7(單核巨噬細(xì)胞)環(huán)孢素D Cyclosporin D質(zhì)量規(guī)格：>95%

人*導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1帕比司他Panobinostat (LBH589, NVP-LBH589)質(zhì)量規(guī)格：>98%,廣譜HDAC抑制劑

GPC3 Others Human 人 Glypican-3 / GPC3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二（芐氧基甲基)-5-氟尿嘧啶1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO5-氟乳清酸水合物5-Fluoroorotic acid hydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶5-Fluoro-1,3-dimethyluracil質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
IL5 Others Canine 狗 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二巰基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98% 2,3-dimercapto-1-propanesulfonate

CM-M009小鼠肺大平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸鈰銨質(zhì)量規(guī)格：AR,>98%Ammonium ceric sulfate

UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3/e細(xì)胞 J774A1(單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞)硫代乙酰胺質(zhì)量規(guī)格：AR, ≥99.0%Thioacetamide

小鼠前細(xì)胞;MFC磺基羅丹明101質(zhì)量規(guī)格：>97%Sulforhodamine 101; Sulforhodamine 640

PRMT5 Others Human 人 PRMT5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 金胺O（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查AURAMINE O
HCT 116人細(xì)胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學(xué)級475MLRT

TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)玫瑰桃紅　R BORDqcUX RqD 2828-33-3

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(HRPEpiC)(5×105 ) HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞 HumanBOC-D-LeucineN-叔丁氧羰基-D-亮酸5克BR，98%

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7銦，英文名或英文縮寫：Indium，級別：AR，98.5%，規(guī)格：100毫升

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (煙酸
人小氣道上皮細(xì)胞形態(tài)HepG2/2-15細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞,RAW 264.7細(xì)胞 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3木蝴蝶苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）Oroxin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21霉素氨丁三醇Fosfomycin tromethamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml1霉素氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Fosfomycin tromethamine質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f木犀草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Cynaroside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 木香烴內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Costundide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品