培養(yǎng)操作步驟：
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。產(chǎn)品僅用于科研 

資源名稱　小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
種屬：BALB/3T3 clone A31

類型：貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

分離基物：BALB/3T3 clone A31細(xì)胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年從裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的幾株細(xì)胞之一

安全等級(jí)：1

模式：菌株未知

應(yīng)用領(lǐng)域BALB/3T3 clone A31細(xì)胞對(duì)接觸抑制特別敏感，生長(zhǎng)需高倍數(shù)稀釋，飽和濃度低。此外，BALB/3T3 clone A31細(xì)胞對(duì)癌基因DNA病毒SV40和小鼠病毒高度易感。

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S

生長(zhǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)1,4-二氨基蒽醌(>90%,BS)1,4-Diaminoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS

CD1d1 Others Mouse 小鼠 CD1D / R3G1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,4-二羥基蒽醌(>96%,BR)1,4-Dihydroxyanthraquinone質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-761,3-二氨基胍鹽酸鹽 1,3-Diaminoguanidine Mono質(zhì)量規(guī)格：>98%

KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,5-二-L-甲狀腺素,3,5-二甲腺原氨酸3,5-diiodo-L-thyronine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CL-0201S-180(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2短葉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Pinobanksin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白(-)-莨菪堿,L-天仙子胺，澳洲毒茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品(-)-Hyoscyamine

Romas(人瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(人二倍體胚肺細(xì)胞)葡聚糖D70/右旋糖苷質(zhì)量規(guī)格：Mw:63000~77000,USP32Dextran D70

CL-0124IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2右旋糖苷/葡聚糖D40質(zhì)量規(guī)格：Mw35 000 to 45 000Dextran D40

TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡聚糖D20/右旋糖苷質(zhì)量規(guī)格：MW:16000~24000Dextran D20

人腸平滑肌細(xì)胞裂解物HISMCL (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol
人永生化細(xì)胞;CNLMG-B5538LC 人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLTributylphosphite亞嶙酸正丁酯100克BR，97%

人絨毛間葉成纖維細(xì)胞RNAHVMF miRNA5 μg本同;基本基同;酰本 ccqtophqnonq;Mqthyl phqnyl kqtonq;BqnzoylMqthcnq;Hypnonq;Phqnylqthcnonq;ccqtylbqnzqnq 98-86-

SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分離試劑

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7Span40司班401公斤BR

CW-2細(xì)胞，腺癌細(xì)胞 皮膚T細(xì)胞瘤,Hut-78細(xì)胞 人成細(xì)胞;MG-63GlycogenTypeIII 100mg/500mg/1g原裝 Sigma G8876
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)木栓酮（標(biāo)準(zhǔn)品）FRIEDELIN質(zhì)量規(guī)格：鑒別

人男性正常細(xì)胞;Hs68 人粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL表木栓醇（標(biāo)準(zhǔn)品）FRIEDELAN-3BETA-OL質(zhì)量規(guī)格：鑒別

人真皮成纖維細(xì)胞-裂解物HDF-a L老龍皮酸；網(wǎng)脊衣酸 A（標(biāo)準(zhǔn)品）(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid質(zhì)量規(guī)格：鑒別用

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 焦性沒食子酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Pyrogallol質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]正十九烷（標(biāo)準(zhǔn)品） N-NONADECANE 質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo)
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。