小鼠肥大細胞瘤細胞（干細胞庫保藏） 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　小鼠肥大細胞瘤細胞（干細胞庫保藏）
種屬：P815

形態(tài)：懸浮

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：小鼠肥大細胞瘤細胞P815 完全培養(yǎng)液 配方（100 ml）： DMEM (Invitrogen, 12430) 89 ml FBS (Gibco) 10 ml Sodium Pyruvate 100 mM Solution（invitrogen 11360070） 1 ml

生長特性：懸浮生長；部分細胞貼壁生長
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是小鼠肥大細胞瘤細胞（干細胞庫保藏） 的相關熱銷產(chǎn)品：
人肺大內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL維生素B1Vitamin B1質量規(guī)格：>99%,USP

SK-MEL-1細胞，人皮膚色素瘤細胞 德氏乳桿菌乳酸亞種 人十二脂腸腺癌;HuTu-80維生素B12(標準品)vitamin B12質量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標簽)10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))10-Undecyn-1-ol質量規(guī)格：>95.0%(GC)

KG-1(人) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞甲基二水楊酸(異構體的混合物)(>90.0%(T))Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers)質量規(guī)格：>90.0%(T)

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B2-氨基-2',5-二氯二苯甲酮(>98.0%(N))2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone質量規(guī)格：>98.0%(N)
KLK1 Others Human 人 KLK-1 / Kallikrein-1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-阿拉伯糖質量規(guī)格：>98%,BRD-(-)-Arabinose

CM-H044人肝動脈內皮細胞完全培養(yǎng)基100mLD-阿拉伯糖(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品D-arabinose

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸組氨瑞林 質量規(guī)格：BR,度>98%Histrelin Acetate

小鼠牙細胞完全培養(yǎng)基 100mL青霉素V鉀質量規(guī)格：1440~1680 U/mg,BRPenicillin V potassium salt

NCI-H929-CMV-EGFP(穩(wěn)定株)人細胞 NCI-H929-CMV-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活)2'-脫氧肌苷質量規(guī)格：>98%,BR2'-deoxyinosine
人上皮細胞cDNAHBEpiC cDNAIKK-16,選擇性IKK抑制劑質量規(guī)格：>98%,BRIKK16

IL1R1 Others Rat 大鼠 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲格列汀琥珀酸鹽 質量規(guī)格：>98%,BRTrelagliptin succinate；SYR-472

3T3A31 小鼠胚胎成纖維細胞2-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇質量規(guī)格：美國進口原裝2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol

CL-0238U-87 MG(人神經(jīng)細胞)5×106cells/瓶×22'-脫氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷質量規(guī)格：美國進口原裝,97%2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元AV-951質量規(guī)格：>98%,VEGFR抑制劑Tivozanib, AV951
小鼠肥大細胞瘤細胞（干細胞庫保藏） C6/36 白紋伊蚊細胞尼羅替尼（標準品）Nilotinib質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

CL-0102Hep 3B(人細胞)5×106cells/瓶×2螺旋霉素Spiramycin質量規(guī)格：>3900IU/MG,EP,BR,可用于細胞培養(yǎng)

人絨毛膜間充質基質細胞螺旋霉素(標準品)Spiramycin質量規(guī)格：含量測定,標準品

人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1 人主動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL螺內酯Spironolactone質量規(guī)格：>99%,USP 32,BR,可用于細胞培養(yǎng)

人真皮微內皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μg螺內酯（標準品）Spironolactone質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
收到小鼠肥大細胞瘤細胞（干細胞庫保藏） 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。