細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人咽鱗癌細(xì)胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人咽鱗癌細(xì)胞
種屬：FaDu

類型：咽鱗癌

形態(tài)：上皮細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：MEM培養(yǎng)基：(GIBCO,貨號(hào)41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人咽鱗癌細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是人咽鱗癌細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
恒河猴腎細(xì)胞;MMK2Boc-D-谷氨酰胺Boc-D-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

CDH5 Others Rat 大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 赤霉素A4+7Gibberllin A4+7質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CHMAS細(xì)胞，人肥大細(xì)胞細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,CT26.WT[CT26WT]細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物BEpiCGS雙(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))Bis(phenylacetyl) Disulfide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2苯并紅紫4B[pH指示劑]Benzopurpurine 4B質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑
NGFR Others Human 人 NGFR/ P75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4,4'-二氨基二苯硫(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品4,4'-Thiodianiline

I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC) γ-Dodecalactone

CAL 27-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人舌鱗癌細(xì)胞 CAL 27-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma DMEM+10% FBS苯并［g,h,i］芘(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Benzo[ghi]perylene

IL21 Protein Mouse 重組小鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白1-十八1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)1-Octadecene

人表皮色素細(xì)胞-深色素(HEM)( 5×105 ) MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse辛胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)n-Octylamine
人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]5-FAM ；5-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格：>95%5-Carboxyfluorescein

HepG2/2-15細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞,RAW 264.7細(xì)胞 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3色素(水溶)質(zhì)量規(guī)格：BSNigrosine water soluble

MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2色素(醇溶）質(zhì)量規(guī)格：BSNigrosin alcohol soluble

Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型套裝 500ml7-羥基;傘形花內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品7-Hydroxycoumarin

人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f6,7,8,9脫氫帕潘立酮鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口6,7,8,9 Dehydro Paliperidone
人咽鱗癌細(xì)胞 神經(jīng)元生長(zhǎng)添加物NGS曲拉通X-114Triton X-114質(zhì)量規(guī)格：BC

CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 曲拉通X-405Triton X-405質(zhì)量規(guī)格：70% in H2O

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLCHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸CHAPS質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

F81細(xì)胞，貓腎細(xì)胞 NCI-H838 [H838](人細(xì)胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21CHAPSO；3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸CHAPSO質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)；

NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)二硫赤蘚醇(DTE)；1,4-二硫代赤蘚醇1,4-Dithioerythritol 質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分sigma