細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人胚腎上皮包裝細(xì)胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人胚腎上皮包裝細(xì)胞
種屬：GP2-293

類型：貼壁生長

形態(tài)：CM1-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細(xì)胞，短梭形、圓形，成塊生長

分離基物：胚腎；上皮細(xì)胞

提供形式：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml離心管2支，干冰費(fèi)另計(jì)。

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：90%高糖DMEM+10%FBS

傳代方法：將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件：37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件：凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人胚腎上皮包裝細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人胚腎上皮包裝細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
人絨癌細(xì)胞;JEG-34-叔丁基杯[4]芳烴-O,O',O'',O'''-四乙酸四乙酯(>96.0%(HPLC))Tetraethyl 4-tert-Butylcalix[4]arene-O,O',O'',O'''-tetraacetate質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)

PPIB Others Human 人 PPIB / CYPB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylthiacalix[4]arene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

家貓肺細(xì)胞;FCA-L14-對乙酰氨基酚硫酸鉀鹽4-Acetaminophen Sulfate Potassium Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-對乙酰氨基酚硫酸鹽-d34-Acetaminophen-d3 Sulfate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CL-0101Hela(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-(N-乙酰-L-半胱氨酸-S-基)對乙酰氨基酚鈉鹽3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 / B7-DC / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蕓苔素內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Brassinolide

CM-M039小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL啶蟲脒(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Acetamiprid

TACSTD2 Others Mouse 小鼠 OP2 / TACSTD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 赫斯特?zé)晒馊剂?/span>33258質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分bisBenzimide H 33258

小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL赫斯特?zé)晒馊剂?/span>33342質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分bisBenzimide H 33342 tri

A498人細(xì)胞 Human renal cell carcinoma A498 cells DMEM+10%FBSFluo-3 AM;鈣熒光探針質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)口Fluo 3-AM
腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基MCM-prf4-(三氟甲基)煙酰胺質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-(Trifluoromethyl)nicotinamide

CDC42BPB Others Human 人 CDC42BPB 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-甲基-煙酰胺化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口1-Methyl-nicotinamide Iodide

人正?；|(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1煙酰胺-2,4,5,6-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Nicotinamide-2,4,5,6-d4

P388D1細(xì)胞，瘤細(xì)胞 人腺癌細(xì)胞,HCT-8細(xì)胞 CM-H020人胰島β細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-(羥甲基)煙酰胺質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-(Hydroxymethyl)nicotinamide

大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6β-萘酚,異萘酚質(zhì)量規(guī)格：AR2-Naphthol
人胚腎上皮包裝細(xì)胞 人葡萄膜色素細(xì)胞;UM四甲基錫(>96.0%(GC))Tetramethyltin質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)

THPO Others Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二氯二茂鋯(>97.0%(T))Zirconocene Dichloride質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)

食管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Chirabite-AR[用于核磁共振]Chirabite-AR質(zhì)量規(guī)格：用于核磁共振

DMP1 Others Human 人 DMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(＞98%(T))Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 質(zhì)量規(guī)格：＞98%(T)

NRK-52E 大鼠腎細(xì)胞三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(＞95%(T))Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)eur(III)質(zhì)量規(guī)格：＞95%(T)