人T淋巴細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人T淋巴細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏）
種屬：Jurkat

類型：外周血

形態(tài)：成淋巴細(xì)胞狀

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：RPMI 1640 Medium (Invitrogen, 11875-093) 90 ml FBS (Gibco) 10 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人T淋巴細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))4,4'-Difluorobenzophenone質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 Eca-109-GFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) in human esophageal cancer cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))1,4-Dibenzoylbenzene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

IL5 Protein Mouse 重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)

人內(nèi)殼細(xì)胞(HHirSC)( 5×105 ) mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Mouse二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]雙酚 C(>98.0%(GC))2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L]小鼠成纖維細(xì)胞 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L] mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L,  Pyruvate 0.11g/L)+10%FBSDL-鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽(>98%，BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCDL-Ornithine, mono

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白DL-1酸(>99%,BP)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BPDL-Tartaric acid hydrate

PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞)D-蘋果酸(>質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRD-Malic acid

CL-0261BC-022(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2dGTP;三1酸脫氧鳥(niǎo)苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate tri salt

IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) dCTP;三1酸脫氧胞苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate di salt
MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞外消旋N-去甲基異丙嗪質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口rac N-Demethyl Promethazine

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN 人肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL異丙嗪亞砜質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Promethazine Sulfoxide

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羥基雷美替胺質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口4-Hydroxy Ramelteon

IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷美替胺代謝產(chǎn)物M-II (羥基位點(diǎn)R型和S型混合物）質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R and S at the hydroxy position)

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5(S)-?；疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
人T淋巴細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 人細(xì)胞;A549 [A-549]瓊脂糖(Biowest,電泳級(jí));西班牙瓊脂糖Agarose質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)口原裝Biowest 111860;電泳級(jí)

家貓腎細(xì)胞;CATK1 肝細(xì)胞，HL-7702細(xì)胞 MMQ細(xì)胞，大鼠細(xì)胞聚乙二醇400PEG 400質(zhì)量規(guī)格：BR

人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C消膽胺樹(shù)脂;考來(lái)1胺Cholestyramine resin質(zhì)量規(guī)格：Each g exchanges 1.8 g- 2.2 g of  glycocholate

RBP4 Others Mouse 小鼠 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蔗糖Sucrose質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí)

神經(jīng)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基NPCMD-海藻糖二水D-(+)-Trehalose, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR
收到人T淋巴細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。