細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞（2013年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞（2013年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏）
種屬：T24

類型：膀胱

形態(tài)：上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：1. 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞完全培養(yǎng)液配方（100 ml）： McCoy's 5a Medium (Invitrogen, 12330-031) 90 ml FBS (Biochrom, S0115) 10 ml

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞（2013年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞（2013年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
人細(xì)胞;HOSDMT保護(hù)性-2'-甲氧基尿苷DMT-2'-OMe-U質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] T細(xì)胞細(xì)胞，HuT78細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細(xì)胞，貂肺上皮細(xì)胞5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系 Human5’-DMT-2’-TBDMS-rU5’-DMT-2’-TBDMS-rU質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

LCN1 Others Human 人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HL-60(原髓細(xì)胞)四溴熒光素鉀鹽(>85.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(HPLC)Tetrabromofluorescein Potassium Salt

CL-0196RKO(人腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein

TMEM25 Others Human 人 TMEM25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,4,5,6-四氯熒光素質(zhì)量規(guī)格：熒光染料3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein

人腦膜細(xì)胞cDNAHMC cDNA赤蘚紅B(>95.0%(E))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(E)Erythrosine B

BT-474細(xì)胞，人導(dǎo)管瘤細(xì)胞 轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞,104C1細(xì)胞 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml4'-羥基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid Hydrate
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2羧甲淀粉鈉shēng huà shì jì容量：5克

CLEC6A Others Human 人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酸激酶 Pyruvate Kinase from rabbit muscle 9001-59-6 1KU 通用試劑

C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells衣康醋;亞基琥珀醋;2-亞基丁二醋;分解屋頭醋 Itcconic ccid;Propylqnqdiccrboxylic ccid 97-62-4

HSC1細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 羅伊氏乳桿菌 人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)3，5-二甲基-3-5克

WPMY-1(人正?；|(zhì)永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21121-60-42-;-2-; 2-; 2-醛基2-Pyridinecarboxaldehyde;Pyridine-2-aldehyde; Picolinaldehyde; 2-Pyridyla dehyde; 2-Pyridinecarbaldehyde;
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞（2013年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 人*癌細(xì)胞;PANC-1溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>Magenta-Gal質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

P815細(xì)胞，肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 人順鉑耐藥株,SGC7901/DDP細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2檸檬酸鎂九水(>Magnesium  nonahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠細(xì)胞;MMQ十二烷基硫酸鎂(分子生物學(xué))Magnesium dodecyl sulfate質(zhì)量規(guī)格：>85%,分子生物學(xué)級(jí)

RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟化鎂(>Magnesium fluoride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

髓核細(xì)胞培養(yǎng)基NPCM-prf氫氧化鎂(>99%,BR)Magnesium hydroxide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR