大鼠腦細胞培養(yǎng)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　大鼠腦細胞培養(yǎng)
種屬：C6

形態(tài)：成纖維細胞樣　

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：F10:Ham＇sF10NutrientMixture2.5%FBS+15%HS　

傳代方法：1:2~1:3傳代；2~3天換液1次。

生長特性：貼壁生長

存儲條件：基礎培養(yǎng)基：+5%DMSO+20%FBS
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是大鼠腦細胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
NCI-H292(人細胞) 5×106cells/瓶×23,4,5,6-四氯熒光素3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格：熒光染料

Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml赤蘚紅B(>95.0%(E))Erythrosine B質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(E)

間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基MSCM-acf-prf4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))4-n-Octyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))4-Octadecyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KM05014-丙氧基苯(>97.0%(GC))4-Propoxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標簽)米諾地爾（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Minoxidil

人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 人肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL7-羥基-4-甲基（標準品）質(zhì)量規(guī)格：≥97%,標準品7-Hydroxy-4-methylcoumarin

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D27-羥基-4-甲基質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR7-Hydroxy-4-methylcoumarin

LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 十一酸睪酮（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Testosterone undecanoate

人*星狀細胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰香蘭素(>質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRo-Vanillin
人肝細胞;HL-7702[L-02]核黃素-5-嶙酸鈉鹽二水物，英文名或英文縮寫：FMN-Na，級別：ACS，98%，規(guī)格：5克

ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5，7，4’-三羌基皇同(-20℃) cpigqnin 20-36-2

CL-0310VE(人內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水*白色薄片RTsigma

RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 人單核細胞型瘤，THP1細胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞)錄亞明T，英文名或英文縮寫：Chloramine T trihydrate，級別：超，99%，規(guī)格：100毫克

綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFPAgarose,TypeA 100g Spannish原裝
大鼠腦細胞培養(yǎng)ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標簽)頭孢克1(標準品)Cefixime質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照) 咪草煙Imazethapyr質(zhì)量規(guī)格：>98%

水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)O-去甲文拉法辛(R型)R-(-)-O-Desmethyl Venlaine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) O-去甲文拉法辛(S型)S-(+)-O-Desmethyl Venlaine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美沙坦Olmesartan質(zhì)量規(guī)格：>99%
收到大鼠腦細胞培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。