培養(yǎng)操作步驟：
L-WRN說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

資源名稱　L-WRN
種屬：Mus musculus，subcutaneous connective tissue; areolar and adipose

提供形式：frozen

模式：菌株未知

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產品：
HUF-c 人類子宮成纖維細胞(HUF) 500,000cells 腎上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)木糖醇(標準品)Xylitol質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

卵巢成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2',3'-二脫氧胸苷(ddT)2',3'-Dideoxythymidine質量規(guī)格：>98%,進分

FCGR2A Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 7,8-二氫-L-生物蝶呤7,8-Dihydro-L-biopterin質量規(guī)格：美國進口

MIN6 小鼠瘤細胞生物蝶呤-d3Biopterin-d3質量規(guī)格：美國進口

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21(6R)-四氫-L-硫酸生物蝶呤-d3(非對映)(6R)-Tetrahydro-L-biopterin-d3 Sulfate(Mixture of Diastereomers)質量規(guī)格：美國進口
SF17細胞，人細胞 洋蔥假單胞菌 人角膜細胞總RNAHK NA非那西丁-乙氧基-2-13C質量規(guī)格：美國進口Phenacetin-ethoxy-2-13C

RL1(大鼠肺成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2非那西丁-乙氧基-1-13C質量規(guī)格：美國進口Phenacetin-ethoxy-1-13C

GNM(人口腔鱗癌頸結轉移癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0320BC3H1(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2 小型豬腎細胞;MPK氟西汀質量規(guī)格：美國進口Fluoxetine

小鼠肺腺癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);LA1-GFP元鹽酸氟西汀質量規(guī)格：美國進口Meta Fluoxetine

CD3D & CD3E Others Human 人 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 伐地那非-d5質量規(guī)格：美國進口Vardenafil-d5
Sars結構蛋白表達株;293 001B 人腎系膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL泛酸測定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：50張/盒

人表皮色素細胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg肖醋 CHROMIUM(III) nitncTq NONcHYDRcTq 7789--8

小鼠腦膜細胞(MMC)(5×105)聚乙二醇 8000 Poly(ethylene glycol) 8,000 (PEG 8000) 25322-68-3 250G 通用試劑

綿羊肺細胞;OAR-L1大黃根酸shēng huà shì jì容量：100克

小鼠Lewis瘤株;LLT 小鼠前脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mLD-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250
L-WRN說明書DLL1 Others Human 人 DLL1 / Delta-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 索非那新琥珀酸鹽Solifenacin succinate質量規(guī)格：>98%,BR

豚鼠皮膚細胞;GP-S2結晶紫Crystal violet質量規(guī)格：BS

NRP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 結晶紫(進口)Crystal violet質量規(guī)格：用于生化研究,進口

腦動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硝基四唑紫(INT)Iodonitrotetrazolium chloride(INT)質量規(guī)格：>98%,BR

293T細胞，人胚腎T細胞 人細胞,HO-8910細胞 人心肌細胞裂解物HCML乙基紫Ethyl Violet質量規(guī)格：80%,進分
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
L-WRN說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。