小鼠肥大細(xì)胞 冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　小鼠肥大細(xì)胞
種屬：MC-9

分離基物：肥大細(xì)胞；C57BL/6 x A/J

提供形式：T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：90%高糖DMEM+10%FBS

生長條件：95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

生長特性：懸浮

存儲條件：90%FBS+10%DMSO 液氮
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是小鼠肥大細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
CWbRL 刺毛鼠肺成纖維樣細(xì)胞雷特格韋Raltegravir質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CM-M116小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL雷特格韋-d3，鉀鹽Raltegravir-d3, Potassium Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

hDPSCs, 人前牙髓干細(xì)胞7-氨基頭孢烷酸7-Aminocephalosporanic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMYM 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL8-羥基喹哪啶(>8-Hydroxyquinaldine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

卵巢上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)9,10-二溴蒽(>9,10-Dibromoanthracene質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
SF767細(xì)胞，人細(xì)胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Methimazole Thio-β-D-glucuronide

RKO-E6(人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Mezlocillin

GBC-SD(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))5×106cells/瓶×2 盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3二去甲基米非司酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Didemethyl Mifepristone

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-122-羥基米非司酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口22-Hydroxy Mifepristone

16. 細(xì)胞系統(tǒng)甲基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml2,4-滴，英文名或英文縮寫：2,4-D，級別：高，99%，規(guī)格：25克

人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg貝那普利相關(guān)物質(zhì)A Bqnczqpril Rqlctqd CoMpound c;(3R)-3-[[(1R)-1-(qthoxyccrbonyl)-3-phqnylpropyl]cMino]-2,3,4,5-tqtrcxy7no-2-oxo-1H-1-bqnzczqpinq-1-ccqtic ccid, Monoxy7nochloridq 12447-89-2

MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 水溶性殼聚糖，英文名或英文縮寫：Chitosan，級別：高 ，98%，規(guī)格：25毫克

豬細(xì)胞;ST1-甲基-1H-咪唑，英文名或英文縮寫：1-metxylimidazole，級別：BR，99%，規(guī)格：1公斤

U251細(xì)胞，細(xì)胞 鼠成纖維細(xì)胞系,NIH/3T3細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7N-Acetyl-D-Glucosamine 10mg/100mg原裝 INALCO1758-0070
小鼠肥大細(xì)胞 Walker氏癌256瘤株;W256石墨粉(>99%,BR)Graphite powder質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

PG-BE1細(xì)胞，人肺巨細(xì)胞癌(PG)的高轉(zhuǎn)移亞系 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞,BHK-21細(xì)胞 CL-0034BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2己二醇(>Hexylene glycol質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2六甲基1酰三胺(>HMPA, hexamethylphosphoramide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HDLEC-c 人類皮膚管內(nèi)皮細(xì)胞(HDLEC)來自少年者 500,000cells 骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)還原茚三酮二水合物(>Hydrindantin hydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3中粘度羥丙基纖維素Hydroxypropyl cellulose質(zhì)量規(guī)格：4000~6500 mpa.s,BR
收到小鼠肥大細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。