培養(yǎng)操作步驟：
人脛細(xì)胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　人脛細(xì)胞
種屬:U-2OS

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 產(chǎn)氣腸桿菌D-色氨酸D-Tryptophan質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-半乳糖胺鹽酸鹽D(+)-Galactosamine 質(zhì)量規(guī)格：BR,98%

TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Dioscin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

人成細(xì)胞;Saos-2薯蕷皂甙Dioscin質(zhì)量規(guī)格：BR，含量≥95.0%

AD293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EB(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人*癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2薯蕷皂素(標(biāo)準(zhǔn)品)Diosgenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
WISH細(xì)胞，人羊膜細(xì)胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6草(>質(zhì)量規(guī)格：>98%，BROxalyldihydrazide

CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白惡唑(>96%，BC)質(zhì)量規(guī)格：>96%，BCOxazole

NCI-H292(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸鈀質(zhì)量規(guī)格：BCPalladium (II) acetate

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2氯化鈀質(zhì)量規(guī)格：BCPalladium (II) chloride

ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Phthalonitrile
EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術(shù)級，600u/mg

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總RNAHIBEpiC NA啊匹油脂　L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3

PAK3 Others Human 人 PAK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細(xì)胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS

中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-IBOVINESERUMALBUMIN,20%SOLUTION牛血清白蛋白溶液生物技術(shù)級500MLCOLD

SMC-1細(xì)胞，胸膜細(xì)胞瘤 早幼粒急性細(xì)胞系,HL-60細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞;U14(化瓊脂)
人脛細(xì)胞說明書人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Rattus碳酸氫鉀(AR)Potassium bicarbonate質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

小鼠細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]十二烷基磺酸鈉(BR) dodecanesulfonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SERPINB3 Others Human 人 SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 茶堿Theophylline質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CM-R102大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL纖維素酶Cellulase質(zhì)量規(guī)格：>2000U/mg

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 小鼠T細(xì)胞,CTLL-2細(xì)胞 HT-29(人細(xì)胞)硫酸軟骨素Chondroitin sulfate質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
人脛細(xì)胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。