人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞形態(tài)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞形態(tài)
種屬：EAG3

形態(tài)：上皮樣；多角形

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維A酸;(標(biāo)準(zhǔn)品)All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

LX-2 人肝星形細(xì)胞比卡魯胺Bicalutamide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P16-姜1酚（標(biāo)準(zhǔn)品）6-Shogaol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HCT116, 人結(jié)細(xì)胞絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品)Gypenoside XLIX質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝實質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLYM-201636YM201636質(zhì)量規(guī)格：>98%,PIKfyve抑制劑
RSPO2 Protein Human 重組人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 標(biāo)簽)鹽酸決奈達(dá)隆質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dronedarone HCl

人氣管平滑肌細(xì)胞 (HTSMC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse鹽酸決奈達(dá)隆-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dronedarone-d6 HCl

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr去丁基鹽酸決奈達(dá)隆-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Desbutyl Dronedarone-d6 HCl

GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) O-脫芳香基雷諾嗪質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口O-Desaryl Ranolazine

CL-0069COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四環(huán)素(國產(chǎn))質(zhì)量規(guī)格：BR,國產(chǎn)Tetracycline
人腦干星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-bs2′-脫氧胞苷-5′-二嶙酸三鈉鹽5克RT

STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三化硼 Boron trifluoride methanol complex sol... 2802-68-8 100ML 通用試劑

猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1L-半胱安醋;L-半膀胱安基醋;L-β-流輕代炳安醋;L-2-安基-3-巰基炳醋 L-Cystqinq;L-2-cMino-3-Mqrccptopropcnoic ccid;L-α-cMino-β-thiopropionic ccid;(R)-2-cMino-3-Mqrccptopropionic ccid;CyS 2-90-4

BALB/3T3細(xì)胞，BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞 人*癌細(xì)胞,PC-2細(xì)胞 CM-M024小鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL焦嶙酸鈉5克2～8℃

大鼠細(xì)胞;UMR-10650-28-2β-雌二醇;雌甾二醇;17β-雌二醇;3,17β-二羥基-1,3,5(10)雌甾三1;1,3,5(10)-雌甾三1-3,17β-二醇;雌甾-1,3,5(10)-三1-3,17β-二醇β-Estradiol;17β-Estradiol;3, 17β-Dixy7noxy-1, 3, 5(10)-estratriene;1, 3, 5(10)-Estratriene-3, 17β-diol;cis-Estradiol;3, 17-Epidixy7noxyestratriene;17β-Estra-1, 3, 5(10)-triene-3, 17β-diol;
人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞形態(tài)IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 天麻素Gastrodin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR

J82 人膀胱移行細(xì)胞癌甜菊苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Stevioside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

NCI-H716 [H716]人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS土貝母苷甲（標(biāo)準(zhǔn)品）Tubeimoside I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白土荊皮乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pseudolaric Acid B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人細(xì)胞 Human土木香內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Alantolactone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
收到人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。