資源名稱　人直腸腺癌細胞
種屬：SW1463 [SW 1463, SW-1463]

類型：貼壁生長

形態(tài)：上皮樣細胞

分離基物：直腸腺癌；女性

提供形式：T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：90%L-15+10%FBS

傳代方法：Volumes used in this protocol are for 75 cm2 flask; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes. <br>Subculture just prior to confluency Remove and discard culture medium. Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA solution to remove all traces of serum which contains trypsin inhibitor. Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes). Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach.&#160; Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal. Add 6.0 to 8.0 mof complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.&#160; To remove trypsin-EDTA solution, transfer cell suspension to the centrifuge tube and spin at approximately 125 x g for 5 to10 minutes. Discard supernatant and resuspend cells in fresh growth medium.&#160; Add appropriate aliquots of cell suspension to new culture vessels. Incubate cultures at 37°C without CO2. Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:3 to 1:8 is recommended <br>Medium Renewal: 1 to 2 times per week<br>

生長條件：Atmosphere: Air, 100%

存儲條件：90%FBS+10%DMSO
人直腸腺癌細胞培養(yǎng)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

培養(yǎng)操作步驟：
人直腸腺癌細胞培養(yǎng)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產品：
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)1,5-二溴蒽(>97.0%(GC))1,5-Dibromoanthracene質量規(guī)格：>97.0%(GC)

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))1,8-Diiodoanthracene質量規(guī)格：>98.0%(GC)

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人氣管平滑肌細胞 (HTSMC)( 5×105 )6-去氟-6-羥基利培酮6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone質量規(guī)格：美國進口

CL-0260BC-021(人癌細胞)5×106cells/瓶×27-羥基利培酮7-Hydroxy Risperidone質量規(guī)格：美國進口
SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Valacyclovir HCl

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RT4細胞，細胞 人胚肺細胞,MRC-5細胞 原代平滑肌細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml維庫溴銨（標準品）質量規(guī)格：>99%,標準品Vecuronium Bromide

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HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) SU11274質量規(guī)格：>98%,選擇性的Met抑制劑SU-11274
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CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠細胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤質量規(guī)格：>97%,原裝進口2,6-Dichloropurine

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人胚腎上皮細胞系;KiMA 人直腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氯甲基蒽質量規(guī)格：>98%，進口原裝9-(Chloromethyl)anthracene

人纖維細胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))質量規(guī)格：>97.0%(GC)1-Bromoanthracene
人直腸腺癌細胞培養(yǎng)MLTC-1(小鼠間質細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2西吡氯銨（標準品）Cetylpyridinium chloride質量規(guī)格：含量測定

Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml硫酸羥氯喹（標準品）Hydroxychloroquine sulfate質量規(guī)格：UV法溶出度檢查

細胞車葉草苷（標準品）Asperuloside質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞裂解液 (陽性對照) Galeterone (TOK001)TOK-001質量規(guī)格：>98%,CYP17抑制劑

G422瘤 神經山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside質量規(guī)格：HPLC≥85%,標準品