細(xì)胞培養(yǎng)過程：

冷凍保存細(xì)胞之方法：
人橫紋肌細(xì)胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人橫紋肌細(xì)胞形態(tài)
種屬:A-204

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS　

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到人橫紋肌細(xì)胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進行傳代操作。
以下是人橫紋肌細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
人絨癌細(xì)胞;JEG-3 大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL帕拉米韋三水合物Peramivir Trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

腦動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)神經(jīng)保護劑NXY059NXY-059,Cerovive質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CN2 Others Mouse 小鼠 Coactin 2 / CN2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) APMSF(進分)p-APMSF, 質(zhì)量規(guī)格：進分,sigma A6664

大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇 (1R,2S)-(+)-cis-1-Amino-2-indanol質(zhì)量規(guī)格：0.98

PC-12(高分化)大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) PC-12 (high differeiation) rat pheochromocytoma cells (high differeiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-BOC-D-色氨醇N-Boc-D-tryptophanol 質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%
T24, 人細(xì)胞他扎羅?。?biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Tazarotene

人細(xì)胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL他扎羅汀質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTazarotene

Hepa 1-6 小鼠細(xì)胞靈芝酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ganoderic acid D

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸左西替利嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Levoceitrizine HCl

615小鼠株;Ca761鹽霉素,沙利霉素質(zhì)量規(guī)格：assay 12%~24%Salinomycin
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)SALICYLICACID水楊酸鈉*100G54-21-6RT

大鼠神經(jīng)質(zhì)細(xì)胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位*腺癌細(xì)胞株 Human錄化鉍 Bismuth trichloridq 7787-60-

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]AIBI偶氮二異基咪唑啉鹽酸鹽500毫克AR

IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸緩沖液蛋白組學(xué)級1LCOLD

人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(多效唑)
人橫紋肌細(xì)胞形態(tài)ACVR1 Others Mouse 小鼠 ALK-2 / ACVR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢噻呋鈉Ceftiofur 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基MM-prf頭孢噻呋鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Ceftiofur 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5'-三1酸胞苷二鈉鹽(二水)Cytidine-5'-triphosphate(CTP) di salt dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL伏格列波糖Voglibose質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

H-4-IL-E 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(內(nèi)2mM Glutamin)+10%胎牛血清，補加非必須氨基酸(100x)伏格列波糖(標(biāo)準(zhǔn)品)Voglibose質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品