資源名稱　人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞
種屬:SU-DHL-2

類型:大B細(xì)胞

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級(jí):1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性:懸浮細(xì)胞

存儲(chǔ)條件:50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
HKC(人胚腎上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小腸耶爾森氏菌BES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸BES free acid質(zhì)量規(guī)格：>99%

內(nèi)皮細(xì)胞生長添加物ECGSCEP-18770CEP-18770質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

CLEC12A Others Human 人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 地馬格列Managlinat Dialanetil/CS-917質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

CSSTSP1 中華鱉脾來源細(xì)胞鹽酸諾拉曲噻Nolatrexed di質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

CM-M124小鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLPD 173074PD 173074質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 黃芪多糖(50%)質(zhì)量規(guī)格：>50%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino黃芪多糖(30%)質(zhì)量規(guī)格：>30%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole

SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%3-Quinuclidinone HCl

QGY-7701, 人細(xì)胞伊索拉定質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRIrsogladine

NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 人腦視神經(jīng)細(xì)胞，Hs 683細(xì)胞 RF/6A(猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞)黃柏酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Obacunone
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Camphore2-莰酮100克CP，96%

C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells芐基三基錄化銨;三基下基錄化銨 BqnzyltriMqthylcMMoniuM chloridq 26-93-9

HME6細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 動(dòng)物雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919 10B Naphthol Blue Black (for electrophores... 1064-48-8 5G 染色劑

UMR-106(大鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24-(對硝基本偶氮)-1-奈酚，英文名或英文縮寫：4-(4-nitnopxenylazo)-1-naphthol，級(jí)別：高，50%，規(guī)格：5克

Hut-102(人皮膚T瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1022MacerozymeR-10 1g/5g/10g/100g原裝 Yakult.JAPAN
人彌漫性大B細(xì)胞細(xì)胞說明書Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0352HFF-1(人成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2天青石藍(lán)Celestine blue質(zhì)量規(guī)格：BS

小鼠T細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9天青 B 曙紅Azure B eosinate質(zhì)量規(guī)格：sigma分裝

TMED1 Others Human 人 TMED1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利馬前列素Limaprost質(zhì)量規(guī)格：>99%

人腸微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL天青II曙紅Azure II eosinate質(zhì)量規(guī)格：BS

AMS2細(xì)胞，人干細(xì)胞因子單*抗體細(xì)胞株 阪崎腸桿菌 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3菲律賓菌素;非律平;FilipinFilipin complex from Streptomyces filipinensis質(zhì)量規(guī)格：sigma分裝