細(xì)胞培養(yǎng)過程：

冷凍保存細(xì)胞之方法：
人前B細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人前B細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)
提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性:懸浮生長

存儲條件:50%RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人前B細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人前B細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
內(nèi)臟脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)脫氫吲達(dá)帕胺Dehydro Indapamide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CHPS-Na；3-氯-2-羥基丙磺酸鈉CHPS-Na質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLSBES；2-溴乙基磺酸鈉 2-bromoethanesulphonate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

293-L.P.人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293-L.P. MEM+10% FBSBICINE；N,N-二羥乙基甘氨酸BICINE質(zhì)量規(guī)格：>99%

IFNG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白BES  salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉BES  Salt質(zhì)量規(guī)格：>99%
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞胺培南-西司他丁鈉質(zhì)量規(guī)格：含量：Imipenem≥400μg/mg，Cilastatin(C16H26N2O5S) ≥400μg/mg,USP36Imipenem and Cilastatin

CL-0435SF126(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2長春西丁,長春西汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BP,BRVinpocetine

HA Others H12N1 甲型 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯妥英鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRPhenytoin

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿扎那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Atazanavir

HL-7702人正常肝細(xì)胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS鹽酸托莫西汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRAtomoxetine HCl
人羊膜細(xì)胞;WISH4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4-Octadecyloxybenzaldehyde

LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-丙氧基苯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4-Propoxybenzaldehyde

HCT 116 人細(xì)胞4'-丁基苯乙酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4'-Butylacetophenone

OS-RC-2人細(xì)胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4'-Butoxyacetophenone

TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白4-酮基9-順式-甲酯視黃酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester
人前B細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)司帕沙星Sparfloxacin質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 司帕沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Sparfloxacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

U251人細(xì)胞 Human glioma cell line U251 DMEM+10% FBS氟喹酮Afloqualone質(zhì)量規(guī)格：>98%

U251細(xì)胞，人神經(jīng)細(xì)胞 滑假絲酵母 人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg氟喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Afloqualone質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2磺胺醋酰鈉 SA-NASufacetamide 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR