細(xì)胞培養(yǎng)過程：

冷凍保存細(xì)胞之方法：
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠細(xì)胞之融合細(xì)胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠細(xì)胞之融合細(xì)胞
種屬:NG108-15[108CC15]

形態(tài):多形細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS　

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠細(xì)胞之融合細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠細(xì)胞之融合細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
A-498(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2薯蕷皂素Diosgenin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細(xì)胞(HNEpC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-半胱氨酸鹽酸鹽一水D-Cysteine  monohydrate質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,BR，一水物

膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鈣蛋白酶抑制劑II(進(jìn)口)Calpain Inhibitor II(ALLM)質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進(jìn)口

LTA4H Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 炔孕酮/素(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethisterone質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人癌細(xì)胞;MDA-MB-453炔孕酮/素Ethisterone質(zhì)量規(guī)格：>98%
WI-38細(xì)胞，人二倍體胚肺細(xì)胞 人,LTEP-a-2細(xì)胞 QBC-939, 人細(xì)胞N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)N-Trimethylsilylacetamide

貓腎細(xì)胞;CRFK1,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)1,1,3,3-Tetramethyldisilazane

NA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole

CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRZ-Gln-OH

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-CBZ-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCBZ-L-Gly
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)3,3'-二硝基二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)3,3'-Dinitrobenzophenone

BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA3172,4'-二氟二苯甲酮(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)2,4'-Difluorobenzophenone

人*成纖維細(xì)胞HCF4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)4,4'-Difluorobenzophenone

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1,4-Dibenzoylbenzene

大鼠腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠細(xì)胞之融合細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3特非那定Terfenadine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CD14 Others Mouse 小鼠 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維生素C鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） ascorbate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]硝酸硫胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Thiamine nitrate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

CX3CL1 Others Canine 狗 Fractalkine / CX3CL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) α-細(xì)辛腦,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品)alpha-Asarone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)鹽酸二氧丙嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Dioxopromethazine 質(zhì)量規(guī)格：鑒別