培養(yǎng)操作步驟：
人細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　人細(xì)胞
種屬:KMS11

類型:懸浮生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，懸浮，圓形細(xì)胞樣，圓形，少數(shù)聚團(tuán)

分離基物:人，

提供形式:復(fù)蘇形式：15ml離心管1支；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將培養(yǎng)好的懸浮細(xì)胞輕輕吹打均勻，分配至2~4個新鮮培養(yǎng)液皿中，輕輕搖勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)液，含谷氨酰胺。

存儲條件:將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，(110g，3min)離心，離心完成后用4mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸細(xì)胞，吹打均勻，分為4支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]腺苷-5'-二1酸，三鈉鹽Adenosine 5'-diphposphate, tri salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-天冬酰胺，無水物（標(biāo)準(zhǔn)品）L-Asparagine Anhydrous質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人B母細(xì)胞;HMy2.CIRL-天冬素/L-天冬酰胺L-Asparagine anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,無水物

RK1 Others Canine 狗 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N'-（三苯甲基）-L-天冬酰胺N'-Trityl-L-asparagine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCFL-天冬氨酸-1-芐酯L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM-acf骨化三醇質(zhì)量規(guī)格：度≥98%,BRCalcitriol

HCE1細(xì)胞，細(xì)胞 小鼠紅細(xì)胞,MEL細(xì)胞 人外膜成纖維細(xì)胞HBVSMC坎地沙坦酯質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Candesartan cilexetil

Hela S3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2甲基麥冬二氫高異黃酮A,甲基麥冬黃烷酮A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Methylophiopogonanone A

hMNC-PB single donor Pellet 人類外周血單核細(xì)胞團(tuán)塊單一捐獻(xiàn)者，超 > 1 mio.cells 人羊膜上皮細(xì)胞總RNAHAmEpiC NA甲基麥冬黃烷酮B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Methylophiopogonanone B

CM-M042小鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL7,2'-二羥基-3′,4′-二甲氧基異黃烷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan
GLC-82-TK細(xì)胞，人(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞 CL-0066COLO 205(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2阿齊沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Azilsartan

SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2伊維菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Ivermectin

HSaVEC-c 人隱內(nèi)皮細(xì)胞(HSaVEC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)SB431542,SB-431542質(zhì)量規(guī)格：>98%TGF-β抑制劑SB-431542

腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)米拉貝隆質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMirabegron

GHR Others Rat 大鼠 GHR / Growth Hormone Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿莫曲普坦 N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Almotriptan N-Oxide
人細(xì)胞 H22 小鼠細(xì)胞乳糖酸(>98%,BC)Lactobionic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-氨基酸氧化酶L-Amino acid oxidase >4 U/mg質(zhì)量規(guī)格：BC

小鼠瘤株;S180L-氨基酸氧化酶L-Amino acid oxidase >4 U/mg質(zhì)量規(guī)格：BC

KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸鑭五水(>99%,BR)Lanthanum (III) acetate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLL-刀豆氨酸硫酸鹽(>L-Canavanine sulfate salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
人細(xì)胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。