人低分化 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人低分化
種屬:SK-LU-1

類型:貼壁生長

形態(tài):上皮樣細胞

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)+10%FBS；1%NEAA,1mM丙酮酸鈉

傳代方法:1:2傳代；每周換液2次。

存儲條件:10%DMSO+90%FBS
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人低分化 的相關熱銷產(chǎn)品：
RA, 大鼠星形膠質細胞L-谷氨酸L-Glutamic acid質量規(guī)格：>99%,BR

3T3/e細胞，小鼠成纖維細胞 白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞,JEG-3/VP16-IL-2細胞 人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μgL-延胡索乙素L-Tetrahydropalmatine質量規(guī)格：美國進口

恒河猴肺細胞;RM-L1尼可地爾-d4Nicorandil-d4質量規(guī)格：美國進口

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) 尼可地爾N-氧化物Nicorandil N-Oxide質量規(guī)格：美國進口

人EB病毒轉化的B細胞;CGM16-羥基尼可地爾6-Hydroxy Nicorandil質量規(guī)格：美國進口
綠色熒光蛋白標記小鼠前細胞;MFC-GFP激素釋放激素相關蛋白（1-13），人Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human質量規(guī)格：>95%,BR

HL-7702細胞，人肝細胞正常 人干細胞因子單*抗體細胞株,AMS2細胞 敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1海沙瑞林Hexarelin質量規(guī)格：>95%,BR

LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞) 5×106cells/瓶×2組胺素5Histatin 5質量規(guī)格：>95%,BR

Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml惡性因子（1-34）酰胺，人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human質量規(guī)格：>95%,BR

人角膜細胞HK惡性因子（1-34）， 人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human質量規(guī)格：>95%,BR
腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)AdoMetS-腺甘基蛋酸100克BR，80%

CSNK2A1 Others Human 人 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 連本三加醋水合物 1,2,3-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 269-21-7

小鼠單核巨噬細胞細胞;RAW 264.7 [RAW264.7;異炳基間本; 3-異炳基本; 1-異炳基-3-基本; 1-基-3-異炳基本; 間本異炳烷; 間異炳基本烷; 間聚傘花速;  M-CyMqnq;Isopropyl-M-toluqnq; 1-Mqthyl-3-isopropylbqnzqnq; 3-Isopropyltoluqnq; 1-Isopropyl-3-Mqthylbqnzqnq; Mqthyl-(3-Mqthylqthyl)bqnzqnq; M-CyMol; 232-77-3

CHO/dhFr-細胞，中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細胞 人細胞,HuH-7細胞 CL-0144LoVo(人細胞)5×106cells/瓶×22-Thiouracil2-硫尿嘧啶5克3.5N，0.25×50㎜

中國倉鼠肺細胞;V792438-80-4L(-)-巖藻糖L-FUCOSE
人低分化 JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系人參二醇(標準品)Panaxadiol質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 小鼠*癌beta細胞，Beta-TC-6細胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細胞)人參三醇(標準品)Panaxatriol質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人紅系細胞;TF-1人參皂苷CK(標準品)Compound K質量規(guī)格：HPLC≥97%，標準品

HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 人參皂苷F1(標準品)Ginsenoside F1質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]人參皂苷F2(標準品)Ginsenoside F2質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
收到人低分化 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。