資源名稱　外周血B細(xì)胞細(xì)胞
種屬:MV-4-11

類型:懸浮生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，懸浮，淋巴母細(xì)胞樣，圓形，少部分聚團(tuán)生長

分離基物:10歲，男孩，

提供形式:復(fù)蘇形式：15ml離心管1支；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計(jì)。

安全等級(jí):1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將培養(yǎng)好的懸浮細(xì)胞輕輕吹打均勻，分配至3~6個(gè)新鮮培養(yǎng)液皿中，輕輕搖勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)液，含谷氨酰胺。

存儲(chǔ)條件:將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，(110g，3min)離心，離心完成后用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸細(xì)胞，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
外周血B細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
外周血B細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-亞硝基-N-甲基尿烷(>95.0%(GC))N-Methyl-N-nitrosourethane質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,EMUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸4-MUG質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米諾地爾Minoxidil質(zhì)量規(guī)格：>98%

CM-R030大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Minoxidil質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 牛胚氣管細(xì)胞,EB細(xì)胞 Hs 578T(人成纖維細(xì)胞)米諾地爾（硫酸鹽）敏樂啶Minoxidil Sulfate質(zhì)量規(guī)格：>99.0%
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7 人胚胎性癌細(xì)胞，Cates-1B細(xì)胞 MDA-MB-453(癌細(xì)胞)胰蛋白酶原質(zhì)量規(guī)格：BCTrypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas

人Butt瘤細(xì)胞;RAJI色胺(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTryptamine

ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三氧化鎢(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCTungsten (VI) oxide

造骨細(xì)胞生長添加物ObGS碳化鎢200(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCTungsten carbide-200

TNFRSF13B Others Human 人 TNFRSF13B / TACI / CD267 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 塞來昔布羧酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Celecoxib Carboxylic Acid
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DHA脫氫醋酸10克BR

人口腔角質(zhì)細(xì)胞裂解物HOKL鹽酸環(huán)胞苷 Ancitabine  10212-25-6 1G 通用試劑

IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 六拂鱗醋 Hqxcfluorophosphoric ccid; 16940-81-1

BRL-3A 大鼠正常肝細(xì)胞dTTP(2'-DEOXYTHYMIDINE-5'-TRIPHOSPHATE)TRIwo7iumSALTDIHYDRATE dTTP, Na3, 2H2O超級(jí)白色干燥結(jié)晶粉末FROZENsigma

CL-0118HT-29(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×299-76-3尼泊金metxylparaben
外周血B細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0922 人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL特比萘芬-d7鹽酸鹽Terbinafine-d7 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1羥基特比萘芬Hydroxy Terbinafine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS胸腺五肽Thymopentin質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SF767細(xì)胞，人細(xì)胞 陰溝腸桿菌 人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA替米考星1酸鹽Tilmicosin phosphate salt質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口