培養(yǎng)操作步驟：
人SV40轉染成骨細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

資源名稱　人SV40轉染成骨細胞
種屬:hFOB 1.19

類型:貼壁

形態(tài):CM9-1培養(yǎng)液中，貼壁，混合型細胞樣，多角形、梭形

提供形式:復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM9-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分2~4皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM9-1培養(yǎng)液。CM9-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H/F12+10%FBS。DMEM-H/F12：DMEM高糖培養(yǎng)液與F12培養(yǎng)液1:1混合，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉移至液氮中保存。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產品：
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系*);CHO-K1 腺癌細胞，SK-BR-3細胞 RK-13細胞，兔腎細胞系DL-胱氨酸DL-Cystine質量規(guī)格：0.98

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 HumanN-氧基曲唑酮Trazodone N-Oxide質量規(guī)格：美國進口

CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細胞裂解液 (陽性對照) 4'-羥基鹽酸曲唑酮4'-Hydroxy Trazodone HCl質量規(guī)格：美國進口

人表皮角質細胞-裂解物HEK-a L鹽酸伐倫克林標記15N3Varenicline  Labeled 15N3質量規(guī)格：美國進口

HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 內酰胺伐倫克林Varenicline Lactam質量規(guī)格：美國進口
人肝竇內皮細胞 (HHSEC) ( 5×105 )四己基化銨(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)Tetrahexylammonium Iodide

CL-0067COLO 320(人細胞)5×106cells/瓶×2四戊基化銨(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)Tetraamylammonium Iodide

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3 大鼠牙細胞完全培養(yǎng)基 100mL四庚基化銨(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)Tetraheptylammonium Iodide

LOVO/Adr 阿霉素耐藥株四苯基化膦(>97.0%(T))質量規(guī)格：>97.0%(T)Tetraphenylphosphonium Iodide

EML1 Others Human 人 EML1 / TLT-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 四苯硼鈉質量規(guī)格：AR tetraphenylboron
B16BL6細胞，小鼠色素瘤細胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) EB病毒轉化的人B細胞;KM932人參皂甙Rb2，英文名或英文縮寫：Ginsenoside Rb2，級別：AR，99.5%，規(guī)格：100克

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標簽)鄰甲基對苯鹽 2,5-Diamino sulfate,97% 615-50-9 25G 通用試劑

SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) 過氧化月桂酰; Lcuroyl pqroxidq;Dodqccnoyl pqroxidq;clpqrox C; 102-74-8

人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16片shēng huà shì jì容量：25克

CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 (aa 1-319) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 紅 3BNA
人SV40轉染成骨細胞說明書Eca-109細胞，人細胞 人細胞,SF126細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系*);CHO Hu 164 SCF 17無蛋白酶牛血清白蛋白Albumin, from bovine Protease free質量規(guī)格：>98%,分子生物學級

CA46(人Butts瘤細胞) 5×106cells/瓶×2硬脂酸鋁Aluminum stearate質量規(guī)格：AR

CD84 Others Human 人 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照) 鉍試劑III(>99%,BR)Bismuth(III) nitrate pentahydrate質量規(guī)格：>99%,BR

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B41酸氫鈣二水(>Calcium phosphate, dibasic, dihydrate質量規(guī)格：>98%,BR

CSF3R Others Human 人 G-CSFR / CD114 人細胞裂解液 (陽性對照) 碳酸鈰Cerium(III) carbonate, hydrate質量規(guī)格：>99.9%,AR
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
人SV40轉染成骨細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。