人Burkitt's細(xì)胞 冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人Burkitt's細(xì)胞
種屬:NAMALWA

類型:B 淋巴細(xì)胞；Burkitt

形態(tài):淋巴母細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

生長特性:懸浮生長
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人Burkitt's細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
人成纖維細(xì)胞;HFFSB1317,TG02SB-1317,TG-02質(zhì)量規(guī)格：>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑

TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PD0325901PD-0325901質(zhì)量規(guī)格：>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin質(zhì)量規(guī)格：度99%

NW38細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11250; Thelin質(zhì)量規(guī)格：度99%

ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11251; Thelin質(zhì)量規(guī)格：度99%
人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-sp)(1×106)多拉司瓊質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dolasetron

BxPC-3, 人原位*腺癌細(xì)胞株多塞平N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxepin N-Oxide

人類原巨核細(xì)胞型細(xì)胞;UT-7 大鼠膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL多塞平鹽酸鹽-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxepin-d3

LM-8 小鼠4-羥基度洛西汀-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Hydroxy Duloxetine-d6

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 地克珠利質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRDiclazuril
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 牛胚氣管細(xì)胞,EB細(xì)胞 Hs 578T(人成纖維細(xì)胞)硅膠Hshēng huà shì jì容量：10KU

小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1姆沙伯 105 CHROMOSORB(R) 105 682-91-9

IL6R Others Mouse 小鼠 IL6RA / CD126 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 聚聚酮 Poly(vinylpolypyrrolidone) [PVPP] 25249-54-1 100G 通用試劑

人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E二氧化鉑shēng huà shì jì容量：500毫克

BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Dextrin 100g/500g原裝 Sigma D2131
人Burkitt's細(xì)胞 小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素Cefazolin質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefazolin質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0165NCI-H1299(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品）Vindoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

L129細(xì)胞，NCTC*929細(xì)胞 人Butt`s瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Theophylline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

AGS(人胃腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2苯甲酰新烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Benzoylmesaconine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
收到人Burkitt's細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。