細胞培養(yǎng)過程：

冷凍保存細胞之方法：
人腎透明細胞癌形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人腎透明細胞癌形態(tài)
種屬:Caki-1

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS　

傳代方法:1:2~1:4傳代；每周換液2~3次。

生長特性:貼壁生長

存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到人腎透明細胞癌形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人腎透明細胞癌形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
PANC-1細胞，人*癌細胞 人橫紋癌細胞,A673細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;MEFPR171關(guān)鍵中間體IVBoc-HPh-Leu-Phe-Ome質(zhì)量規(guī)格：>97%

HO-8910(人細胞) 5×106cells/瓶×2Pneumadin，大鼠Pneumadin (rat)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(人細胞分離液) 100ml朊病毒肽（106-126），人Prion Peptide (106-126),Human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人成纖維細胞裂解物HMFL前腎上腺髓質(zhì)素（1-20），人Proadrenomedullin (1-20)(human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 前腎上腺髓質(zhì)素（45-92），人Proadrenomedullin (45-92)(human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
人間充質(zhì)干細胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg肌酐（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用Creatinine

FC33細胞，Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞 小鼠垂體細胞,MPC細胞 人臍動脈內(nèi)皮細胞雙氯芬酸鉀（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Diclofenac Potassium

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2依西美坦（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Exemestane

hCD133+-CB-c pooled 從臍帶血提取的人類CD133+祖細胞(hCD134+-CB)，混合來源 100000 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc鹽酸曲美他嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Trimetazidine

小鼠成肌細胞;C2C12多1紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進口Docetaxel-d5
SERPINA12 Protein Human 重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 標(biāo)簽)鈣100克

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP 人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL錄鉑醋(+4℃) CHLOROPLcTINIC cCID HqXcHYDRcTq 18497-13-7

人癌細胞;MDA-MB-468甘油 (細胞培養(yǎng)級) Glycerol (cell culture tested, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用試劑

人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )EOSINYwo7iumSALT伊紅Y鈉生物染料級橙紅色粉末RTsigma

CM-R080大鼠大隱內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLD-Trehalose 5g/10g/250g原裝 Sigma T5251
人腎透明細胞癌形態(tài)非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C三丁基化锍(>96.0%(T))Tributylsulfonium Iodide質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(T)

UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌螺[1,3,3-三甲基吲哚苯并二氫吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

人急性母細胞性細胞;MOLT-4 大鼠肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL1,3,3-三甲基吲哚-奈諤嗪(>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinonaphthospirooxazine [Photochromic Compound]質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

心房肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3,3-二苯基-3H-萘并[2,1-b]吡喃(>98.0%(HPLC))3,3-Diphenyl-3H-naphtho[2,1-b]pyran質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫靛紅Thioindigo質(zhì)量規(guī)格：