人子宮內(nèi)膜腺癌細胞說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人子宮內(nèi)膜腺癌細胞說明書
種屬:HEC-1-A

類型:貼壁生長

形態(tài):CM5-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細胞，多角形

分離基物:這株細胞及其亞株HEC-1-B是H.Kuramoto及其同事1968年從一位IA期患者身上分離得到的。

提供形式:復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

應用領域:PAF可以誘導其c-fos的表達。

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%McCoy’s 5a+10%FBS

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM5-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM5-1培養(yǎng)液。CM5-1培養(yǎng)液：90%Mc Coy’s 5a+10%FBS。Mc Coy’s 5a：Mc Coy’s 5a培養(yǎng)液。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人子宮內(nèi)膜腺癌細胞說明書的相關熱銷產(chǎn)品：
EPOR Others Human 人 EPOR / Erythropoietin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 芴(標準品)Fluorene質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥99.5%(HPLC)

人二倍體細胞;HELβ-胡蘿卜素（標準品）β-Carotene質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%，標準品

大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106)胡麻屬苷（標準品）Sesamoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CM-H015人成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL葫蘆巴堿鹽酸鹽（標準品）Trigonelline 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

615小鼠T細胞性瘤株;L7712 小鼠腎實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL葫蘆素B(標準品)Cucurbitacin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標準品
人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )3-甲氧基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國進口3-Methoxy Desloratadine

CL-0163MSTO-211H(人細胞)5×106cells/瓶×2異地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國進口Iso Desloratadine

人細胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-甲基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Methyl Desloratadine

raw264.7 小鼠單核巨噬細胞細胞5-羥基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國進口5-Hydroxy Desloratadine

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹酚酸B（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Salvianolic acid B
小鼠成纖維細胞;φ2 小鼠氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-壬?；?/span>-N-甲基葡萄糖胺100克

HCT116/L 人耐奧沙利鉑耐藥株減性藍6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8

SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) 青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8

人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0氫氧化鋁1克

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照) (IV型膠原酶)
人子宮內(nèi)膜腺癌細胞說明書ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照) 巖白菜素(標準品)Bergenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21巖白菜素Bergenin質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

TLR2 Others Human 人 TLR2 / CD282 (aa 1-587) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿(標準品)Palmatine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CL-0025AR42J(大鼠*外分泌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸巴馬汀,鹽酸掌葉防己堿Palmatine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR

Hepa 1-6, 小鼠細胞 細胞,RCC-krause細胞 SK-HEP-1(細胞)鹽酸黃柏堿(標準品)Phellodendrine chloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
收到人子宮內(nèi)膜腺癌細胞說明書處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。