人舌鱗癌細(xì)胞 冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人舌鱗癌細(xì)胞
種屬:Tca-8113

類型:舌癌

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI-1640(GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，80%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，20%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人舌鱗癌細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
人細(xì)胞;A549 [A-549]腺苷；腺嘌呤核苷Adenosine質(zhì)量規(guī)格：BR,>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

CLEC4B2 Others Rat 大鼠 CLEC4B2 / mDCAR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿戈美拉?。?/span>I型）Agomelatine質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，I晶型

CL-0425RKO-AS45-1(人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2吡拉西坦Piracetam質(zhì)量規(guī)格：>99%

XJH細(xì)胞，B細(xì)胞 人男性正常細(xì)胞系,HS68細(xì)胞 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]雷美替胺Ramelteon質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

斑馬魚(yú)尾鰭細(xì)胞;AB.9拉科酰胺Lacosamide質(zhì)量規(guī)格：>98%
人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1N-氧基長(zhǎng)春新堿質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Vincristine N-Oxide

LLC-MK2細(xì)胞，恒河猴腎細(xì)胞 人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-E6細(xì)胞 CM-H117人腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-去乙?；L(zhǎng)春新堿甲代硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口4-Desacetyl Vincristine Methosulfate

正常大鼠腎細(xì)胞;NRKN-去甲酰-4-去乙酰長(zhǎng)春新堿質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Desformyl-4-desacetyl Vincristine

IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-甲酰長(zhǎng)春堿(長(zhǎng)春新堿雜質(zhì)G)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Formyl Leurosine

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞MM卡巴拉汀代謝產(chǎn)物(NAP226-90) -標(biāo)記d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Rivastigmine Metabolite (NAP226-90) - Labeled d4
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白腦心浸液100毫升

SW620(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-類胱酸 L-Homocystine,≥98% 626-72-2 100MG 通用試劑

人肺泡上皮細(xì)胞HPAEpiC流醋天仙子安 HyoscycMinq Sulfctq 6832-16-1

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 化高鐵血紅蛋白參比液100g100張RT

KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人細(xì)胞(彝族)144-48-9化乙酰胺(2-8℃)2-Iodoacetamide
人舌鱗癌細(xì)胞 雪旺細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SCGS鹽酸阿米洛利(標(biāo)準(zhǔn)品)Amiloride  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3，5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate質(zhì)量規(guī)格：檢查

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0928苯噻啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Pizotifen質(zhì)量規(guī)格：檢查

CNE1細(xì)胞，人細(xì)胞(高分化) 小鼠細(xì)胞,P3-X63-Ag8.653細(xì)胞 草魚(yú)*細(xì)胞;L8824β-環(huán)糊精（標(biāo)準(zhǔn)品）β-Cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

NCI-H1299(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2卡托普利二硫化物（標(biāo)準(zhǔn)品）Captopril Disulfide質(zhì)量規(guī)格：檢查
收到人舌鱗癌細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。