資源名稱　人結細胞（干細胞庫保藏）
種屬:LoVo

類型:

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:Ham's F-12K (Kaighn's) Medium (Invitrogen, 21127-022) 90 ml FBS (Gibco) 10 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

生長特性:貼壁生長
人結細胞（干細胞庫保藏）形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

培養(yǎng)操作步驟：
人結細胞（干細胞庫保藏）形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP 人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside質量規(guī)格：>98%,BC

人癌細胞;MDA-MB-468N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺Z-Gln-OH質量規(guī)格：>98%,BR

人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )N-CBZ-L-丙氨酸CBZ-L-Gly質量規(guī)格：>98%,BR

CM-R080大鼠大隱內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸丙美卡因Proparacaine HCl質量規(guī)格：>98%,BR

C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-芐氧羰基-L-絲氨酸Z-Ser-OH質量規(guī)格：>98.5%,BR
犬腎細胞;MDCK/IgRDL-甲硫氨酸;蛋氨酸質量規(guī)格：>99%,BRDL-Mine

RK3 Others Human 人 kC / RK3 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-天冬氨酸質量規(guī)格：0.98DL-Aspartic acid

CL-0264C918(人眼脈絡色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2DL-谷氨酰胺質量規(guī)格：>98%,BRDL-Glutamine

HA Others H4N8 甲型 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-beta-苯丙氨酸(>質量規(guī)格：>98%，BRDL-beta-Phenylalanine

小鼠上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-肉堿鹽酸鹽質量規(guī)格：>98%,BRDL-Carnitine
BT-20(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人肺動脈平滑肌細胞HPASMC(E/Z)-N,N-二去甲基-4-羥基它莫西芬質量規(guī)格：美國進口(E/Z)-N,N-Didesmethyl-4-hydroxy Tamoxifen

人視網(wǎng)膜色素上皮細胞總RNAHRPEpiC NA4'-羥基它莫西芬質量規(guī)格：美國進口4'-Hydroxy Tamoxifen

ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細胞裂解液 (陽性對照) β-羥基它莫西芬質量規(guī)格：美國進口β-Hydroxy Tamoxifen

MG-63 人成細胞順式-β-羥基它莫西芬質量規(guī)格：美國進口cis-β-Hydroxy Tamoxifen

CL-0385MFC-GFP(小鼠前細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2(S)-鹽酸樂卡地平質量規(guī)格：美國進口(S)-Lercanidipine
人結細胞（干細胞庫保藏）形態(tài)ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅標準溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3) standard質量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3

小鼠紋狀體神經(jīng)元MN-s鋅標準溶液(100μg/ml,,基體:1%HNO3) standard質量規(guī)格：100μg/ml,,基體:1%HNO3

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 蚜滅1標準溶液(0.100mg/ml) Vamidothion standard solution質量規(guī)格：0.100mg/ml

人胚;MRC-5優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 46)Vacuum pump oil質量規(guī)格：Viscosity Grade 46

DMS153細胞，人小細胞細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞,PC12細胞 CM-H127人晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 68)Vacuum pump oil質量規(guī)格：Viscosity Grade 68