細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

資源名稱　人成細胞
種屬:MG-63

類型:貼壁生長

形態(tài):CM1-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細胞，長梭形

分離基物:該細胞源自14歲患有的白人男性；

提供形式:復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

應用領域:聚次黃嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸、*和放線菌素D可以誘導產生高水平的干擾素。該細胞表達TGF-β受體Ⅰ和Ⅱ。

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉移至液氮中保存。

人成細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

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AM(人腺樣囊性癌細胞(高轉移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠前細胞;MFC-GFP鹽酸貝他定(進口)Bestatin HCl質量規(guī)格：≥98%,美國進口

人表皮色素細胞-中色素總RNAHEM-m NAN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine質量規(guī)格：美國進口

SERPINB4 Others Human 人 SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine質量規(guī)格：美國進口

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21D-赤-鞘氨醇(硫酸)D-erythro-Sphingosine (sulfate)質量規(guī)格：美國進口

BEL-7404細胞，細胞 人子宮膜腺癌細胞,HEC-1-B細胞 小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFPD-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽D-erythro-Sphingosine-1-phosphate質量規(guī)格：美國進口
人 (HPF)( 5×105 ) mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞 Mouse萘哌地爾質量規(guī)格：>98%,BRNaftopidil di

中國倉鼠卵巢細胞;CHO萘哌地爾（標準品）質量規(guī)格：含量測定Naftopidil di

CES1D Others Mouse 小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 人細胞裂解液 (陽性對照) 厄貝沙坦（標準品）質量規(guī)格：含量測定Irbesartan

CL-0085GBC-SD(人細胞)5×106cells/瓶×2馬來酸替加色羅（標準品）質量規(guī)格：UV法含量測定Tegaserod maleate

Hela/DDP細胞，Hela細胞耐藥亞株 人急性T母細胞細胞,MOLT-4細胞 小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP蛻皮激素（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Ecdysterone
CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-正亮酸25克RT

新生兒細胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1

CFSC-8B細胞，大鼠肝星形細胞 L-02(正常肝細胞) tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5L-組酸1克RT，避光

EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽)一性鞋套100U2～8℃

WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T395-68-12，4-二2,4-Dimetxyl aniline
人成細胞說明書Eca-109(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0246YAC-1(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠肺細胞;V79細胞弛素E(>Cytochalasin E質量規(guī)格：>98%，BR

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5D-樟腦酸(>99%,BR)D-(+)-Camphoric acid質量規(guī)格：>99%,BR

CRIP2 Others Human 人 CRIP2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D(+)-二苯甲酰1酸一水(>D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate質量規(guī)格：>98%，BR

原代系膜細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml己二11酸二胺(>DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide質量規(guī)格：>98%，BR

mCF, 小鼠*成纖維細胞 小鼠雜交瘤細胞，7F2細胞 EL4. IL-2(瘤細胞)十二1基丁二1(>DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous質量規(guī)格：>98%，BR
培養(yǎng)操作步驟：
人成細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。