大鼠胰島β細胞瘤細胞形態(tài)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　大鼠胰島β細胞瘤細胞形態(tài)
種屬:RIN-m5F

形態(tài):上皮細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

生長特性:貼壁生長
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是大鼠胰島β細胞瘤細胞形態(tài)的相關熱銷產(chǎn)品：
人胚胎*成纖維樣細胞;HEH2 人子宮成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL2'-脫氧鳥苷-3'-單1酸二鈉2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人表皮角質(zhì)細胞-新生HEK-nN-乙酰-DL-甲硫氨酸N-Acetyl-DL-mine質(zhì)量規(guī)格：0.99

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-高半胱氨酸DL-Homocysteine 質(zhì)量規(guī)格：0.95

大鼠直腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL間氟-DL-酪氨酸m-Fluoro-DL-tyrosine 質(zhì)量規(guī)格：0.99

BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yǎng)基10%FBS鈣蛋白酶抑制劑I(進口)Calpain Inhibitor I(ALLN) 質(zhì)量規(guī)格：≥95%,美國進口
人骨骼肌衛(wèi)星細胞總RNAHSkMSC NAL-色氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Tryptophan

CHRF細胞，人巨核細胞 人細胞系(未分化),Calu-6細胞 5637, 人細胞L-色氨酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品L-Tryptophan

家貓皮膚細胞;FCA-S1L-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Serine

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) L-賴氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRH-Lys-OH.HCl

CL-0353hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞)5×106cells/瓶×2L-鳥氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Ornithine mono
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL3'-對羥基紫杉醇質(zhì)量規(guī)格：美國進口3'-p-Hydroxy Paclitaxel

SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細胞 Human紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進口Paclitaxel-d5

BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-差向紫杉酚質(zhì)量規(guī)格：美國進口7-epi-Taxol

人小氣道上皮細胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg紫杉醇C質(zhì)量規(guī)格：美國進口Paclitaxel C

SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細胞裂解液 (陽性對照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇質(zhì)量規(guī)格：美國進口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel
大鼠胰島β細胞瘤細胞形態(tài)人顱骨造骨細胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠腎細胞 Rattus芴甲氧羰酰氯（Fmoc-Cl）Fmoc chloride質(zhì)量規(guī)格：用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5氟羅里硅土(農(nóng)殘級)Florisil®質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級

人小腦顆粒細胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)質(zhì)量規(guī)格：250-125um

Ⅱ型肺泡上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)吡氟禾草靈標準溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl solution質(zhì)量規(guī)格：0.101mg/ml

人髓母細胞瘤細胞;D341Med 大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL惡唑酮菌(標準品) Famoxadone solution質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,98.5%
收到大鼠胰島β細胞瘤細胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。