培養(yǎng)操作步驟：
人食管鱗癌細(xì)胞培養(yǎng)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　人食管鱗癌細(xì)胞
種屬:KYSE-150

類型:食管鱗癌

形態(tài):長成貼壁單層的上皮細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI 1640/F12, 10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 Mouse恩諾沙星Enrofloxacin 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿達(dá)帕林(標(biāo)準(zhǔn)品)Adapalene質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

人非小細(xì)胞;NCI-H2087阿德福韋Adefovir質(zhì)量規(guī)格：>98%

人表皮內(nèi)管皮細(xì)胞(HDLEC)(5×105)阿德福韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Adefovir質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系阿爾法骨化醇alfacalcidol質(zhì)量規(guī)格：>99%
人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1丹參酮IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tanshinone IIA

VNN2 Others Human 人 VNN2 / Vanin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丹參酮IIA質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTanshinone IIA

小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)丹參酮IIA-磺酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%,HPLC≥95%Tanshinone IIA-sulfonic

ERP27 Others Human 人 ERP27 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丹酚酸A（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid A

大鼠膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL戴斯-馬丁氧化劑 質(zhì)量規(guī)格：>95%Dess-Martin periodinane
犬胸腺細(xì)胞;cf2Th溶血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：100克

CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 別嘌醇相關(guān)物質(zhì)F cllopurinol Rqlctqd CoMpound F;qthyl-(q/Z)-5-(2-ccrbqthoxy-2-cycnoqthqnyl)cMino-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31271-07-7

組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml胞苷 99% Cytidinq 62-46-3

GT1.1細(xì)胞，小鼠細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素) 人細(xì)胞系,Anglne細(xì)胞 人骨骼肌細(xì)胞裂解物HSkMCL硼酸5克

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2(II型膠原酶)
人食管鱗癌細(xì)胞培養(yǎng)大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1鹽酸阿可樂定/鹽酸安普樂定（標(biāo)準(zhǔn)品）Apraclonidine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定

GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 他扎羅?。?biāo)準(zhǔn)品）Tazarotene質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定

雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)他扎羅汀Tazarotene質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 靈芝酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)Ganoderic acid D質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞鹽酸左西替利嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Levoceitrizine HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
人食管鱗癌細(xì)胞培養(yǎng)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實(shí)驗服務(wù)。