培養(yǎng)操作步驟：
綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞
種屬:HeLa-GFP

形態(tài):上皮樣；多角

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；G418200ug/ml

傳代方法:1:3傳代；5~7天1次。

生長特性:貼壁生長

存儲(chǔ)條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
人胎盤絨毛膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-氧基奧氮平Olanzapine N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

MA-891細(xì)胞，小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 L929(成纖維細(xì)胞) 人葡萄膜色素細(xì)胞;UM氨曲南Aztreonam質(zhì)量規(guī)格：> 95%,BR

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)氨曲南（標(biāo)準(zhǔn)品）Aztreonam質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品

RH-35(大鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 巴卡丁 IIIBaccatin III質(zhì)量規(guī)格：度> 98%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)

人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201巴卡丁 III（標(biāo)準(zhǔn)品）Baccatin III質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人*成纖維細(xì)胞( HCF) ( 5×105 ) GC-1, 鼠精原細(xì)胞 Mouse二苯并-21-冠7-(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)Dibenzo-21-crown 7-Ether

小鼠成纖維細(xì)胞;φ24'-甲酰苯并-15-冠-5-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether

TNFRSF17 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4'-甲酰苯并-18-冠-6-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether

SHG-44人細(xì)胞 Human glioma cell line SHG-44 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4,7,13,21,24-六氧雜-1,10-二氮雜雙環(huán)[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane

IMR-32細(xì)胞，人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 黃桿菌屬 人平滑肌細(xì)胞RNAHBCSMC miRNA5 μg二-N-去乙基胺酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Di-N-desethyl Amiodarone
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) X-SA瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT1把/包

MEG-01 人成巨核細(xì)胞細(xì)胞偶氮錄膦mN;2-(4-錄-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-肖基本偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo MN 77320-04-0

MSTO-211H人細(xì)胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS (50%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 50% ... 111-30-8 10ML 通用試劑

MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)L-天門冬酸鉀shēng huà shì jì容量：RT25克

人胚;WI-38 [WI38] 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(二硫代蘇糖醇)
綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0920鹽酸洛美沙星Lomefloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

293FT細(xì)胞，表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞 大鼠肝細(xì)胞瘤,H4-II-E-C3細(xì)胞 CL-0324BT-20(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸洛美沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Lomefloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格：含量測定

BC-009(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氯替潑諾Loteprednol Etabonate質(zhì)量規(guī)格：>99.0%

HTEpC-c 人類氣管上皮細(xì)胞(HTEpC) 500,000cells 人平滑肌細(xì)胞HBVSMC氯替潑諾(標(biāo)準(zhǔn)品)Loteprednol Etabonate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml洛伐他汀Lovastatin,Monacolin K質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。