培養(yǎng)操作步驟：
人顱骨成骨細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　人顱骨成骨細胞
種屬:HCO

分離基物:顱骨；成骨細胞

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

生長特性:貼壁生長

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
LS180細胞，人腺癌細胞 人眼脈絡(luò)色素瘤細胞,MuM-2B細胞 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]阿普斯特;CC10004Apremilast;CC-10004質(zhì)量規(guī)格：>98%,PDE4和TNF-α抑制劑

HGC-27(人細胞) 5×106cells/瓶×2氨丁三醇（標(biāo)準(zhǔn)品）TRISTEARIN質(zhì)量規(guī)格：鑒別

CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸替扎尼定（標(biāo)準(zhǔn)品）Tizanidine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定

人肺微內(nèi)皮細胞HPMECTubastatin A HCLTubastatin A 質(zhì)量規(guī)格：>98%,HDAC6抑制劑

CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸莫索尼定（標(biāo)準(zhǔn)品）Moxonidine 質(zhì)量規(guī)格：含量測定
人胎盤羊膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL醋酸Hydrocortisone Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

SAC-II B2細胞，小鼠腹水瘤細胞 BRL 3A(大鼠肝細胞) 人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1醋酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Hydrocortisone Acetate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸伊達比星IdarubicinHCl質(zhì)量規(guī)格：含量960~1030μg/mg,USP30

RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸伊馬替尼Imatinib Mesylate質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

人結(jié)膜細胞裂解物HConFL甲磺酸伊馬替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）Imatinib Mesylate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
尿道上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2′-脫氧胞苷-5′-三嶙酸三鈉鹽25克

CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-錄-1-羌基本并三氮坐 (Cl-HOBt) (2-8℃) 6-Chloro-1-xy7noxibqnzotriczol 6198-19-6

小鼠單核巨噬細胞;J774A.1GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍蛋白組學(xué)級250G1950-1-1RT

973細胞，人細胞 小鼠成骨細胞系,MC3T3-E1細胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量：20KU

THP-1(人髓系單核細胞) 5×106cells/瓶×2POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597
人顱骨成骨細胞說明書AAV-293細胞，人人胚腎細胞 大鼠心肌細胞,H9c2(2-1)細胞 CL-0332Dami(人巨核細胞細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸卡替洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）2(1H)-QUINOLINONE質(zhì)量規(guī)格：鑒別

BC-019(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2二甲磺酸阿米三嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Almitrine Bismesylate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

HMEpC-c 人類上皮細胞(HMEpC) 500,000cells 人神經(jīng)細胞HN蘿巴新（標(biāo)準(zhǔn)品）Raubasine質(zhì)量規(guī)格：含量測定

原代肝實質(zhì)細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml卡莫氟(標(biāo)準(zhǔn)品)Carmofur質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用

CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 尼可占替諾（煙酸占替諾）標(biāo)準(zhǔn)品Xanthinol nicotinate質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
人顱骨成骨細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。