培養(yǎng)操作步驟：
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)細(xì)胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)細(xì)胞
種屬:HCT116-RFP

形態(tài):上皮樣；多角形

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:IMDM:Iscove＇sModiefiedDulbecco＇sMedium10%FBS

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
NCI-H292細(xì)胞，人細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移) 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3細(xì)胞 CM-R071大鼠輸尿管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL縮宮素,醋酸催產(chǎn)素Oxytocin Acetate質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

RF/6A(猴視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2奧沙拉秦鈉Olsalazine di質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Gibco 12680013 LHC-9 Medium (1X), Liquid 500 ml奧沙拉秦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Olsalazine di質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞cDNAHIBEpiC cDNA鹽酸吡格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Pioditazone 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

MIF Others Mouse 小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去氧氟尿苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
人雪旺細(xì)胞cDNAHSC cDNA5-溴-2’-脫氧尿苷(BRDU)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR5-Bromo-2-deoxyuridine

豬內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01 細(xì)胞，SW1353細(xì)胞 EMT-6細(xì)胞，小鼠癌細(xì)胞株胞苷；胞嘧啶核苷質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)Cytidine

人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]胞嘧啶核苷,胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cytidine

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) dATP,三1酸脫氧腺苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR2'-Deoxyadenosine 5'-triphosphate di salt

CL-0200RWPE1(人上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×25,6-二甲基-1-茚酮質(zhì)量規(guī)格：>99%5,6-Dimethoxy-1-indanone
大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1 細(xì)胞，MGC80-3細(xì)胞 L-MTK細(xì)胞，鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株無水錄化金100毫克

Hep G2, 人細(xì)胞系 Human甘油激酶 Glycerokinase from Bacillus stearother... 9030-66-4 1KU 通用試劑

CEACAM8 Others Human 人 CEACAM8 / CD66b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異舒普林言醋鹽 Isoxsuprinq xy7nochloridq 279-26-6

人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNALINEARACRYLAMIDE,5MG/ML線性酰胺,5mg/ml生物技術(shù)級5X1MLCOLD

PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 826-62-0內(nèi)甲基四氫本二酐Himic anhydride
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)細(xì)胞形態(tài)L1210細(xì)胞，細(xì)胞 人細(xì)胞,HepG-2細(xì)胞 CM-M118小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸納曲酮Naltrexone 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1三苯胂氧化物Triphenylarsine oxide質(zhì)量規(guī)格：BR

EGFR Others Human 人 EGFR / ErbB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

原代軟骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)Aloin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SERPINB3C Others Mouse 小鼠 Serpinb3c 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)細(xì)胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。