人免疫球蛋白lambda細(xì)胞說明書冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人免疫球蛋白lambda細(xì)胞說明書
種屬:MM.1S

類型:半貼壁半懸浮生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，半貼壁半懸浮，上皮細(xì)胞樣，圓形，不規(guī)則形

分離基物:該細(xì)胞源于患有的黑人女性患者， CD25+， CD38+， CD52+， CD59+，表達(dá)糖皮質(zhì)激素受體（GR），分泌IgGλ輕鏈，對地塞米松敏感。

提供形式:復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計(jì)。

安全等級(jí):1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將培養(yǎng)液（含懸浮細(xì)胞）吸至離心管中，(110g，3min)離心，收集細(xì)胞；皿中細(xì)胞用PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。①傳代：將以上皿細(xì)胞用10mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化，離心管細(xì)胞用2mLCM2-1培養(yǎng)液重懸，共計(jì)12mL培養(yǎng)液一并吸至皿里混勻，分3~6皿培養(yǎng)

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)基，含谷氨酰胺。

生長特性:生長速度慢，剛復(fù)蘇后是懸浮生長，過段時(shí)間后會(huì)出現(xiàn)輕微貼壁現(xiàn)象

存儲(chǔ)條件:凍存：用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，后吸出與離心管細(xì)胞混勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人免疫球蛋白lambda細(xì)胞說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
CD200 Others Mouse 小鼠 CD200 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-鹽酸奧昔布寧(S)-Oxybutynin 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞裂解物HIBEpiCL奧司他韋酸Oseltamivir Acid質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 地布卡因Dibucaine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地布卡因-d9Dibucaine-d9 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

MC53細(xì)胞，小鼠腎系膜細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細(xì)胞;F81多利培南Doripenem質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人*癌細(xì)胞;PANC-1甲咪唑煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Imazapic

KLK7 Others Human 人 KLK7 / PRSS6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=6%）質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%Iprobenfos standard solution

CM-H061人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氘代鹽酸(5g )質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride

CD177 Others Human 人 CD177 / PRV-1 / PRV1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(5g )質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 35% IN D2ODeuterium Chloride

人真皮內(nèi)皮細(xì)胞HDLEC氘代鹽酸(10g)質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride
Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium DXF, M2-巨噬細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml雙嘧達(dá)莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide

人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNAHASMC cDNA雙嘧達(dá)莫-D20 (主要的)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dipyridamole-D20 (Major)

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達(dá)莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide

人皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酮基他米巴羅汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Keto Tamibarotene

C2C12細(xì)胞，鼠肌原細(xì)胞 H08910(細(xì)胞) 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1ent-伏立康唑質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口ent-Voriconazole
人免疫球蛋白lambda細(xì)胞說明書Dami(人巨核細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞HVMF鹽酸尼莫司汀Nimustine HCl(ACNU)質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100mlBEZ235 (Dactolisib)NVP-BEZ 235質(zhì)量規(guī)格：>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑

IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 吡嘧司特鉀Pemirolast potassium質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL培哚普利Perindopril erbumine質(zhì)量規(guī)格：>98%,鹽形式

VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細(xì)胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS保泰phenylbutazone質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP
收到人免疫球蛋白lambda細(xì)胞說明書處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。