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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3342 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮樣細胞,多角形,緊密排列 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
人正常卵巢上皮細胞培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
人正常卵巢上皮細胞培養(yǎng) | 貼壁生長 | CSX3342 |
資源名稱 人正常卵巢上皮細胞
種屬:IOSE80
類型:貼壁生長
形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮樣細胞,多角形,緊密排列
提供形式:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶1瓶;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費另計。
安全等級:1
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約2min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)液,含谷氨酰胺。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
培養(yǎng)操作步驟:
人正常卵巢上皮細胞培養(yǎng)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
TM4(正常小鼠Sertoli細胞) 5×106cells/瓶×2貝美格(標準品)3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE質(zhì)量規(guī)格:含量測定
Hs 746T(人細胞) 5×106cells/瓶×2 COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;AAV-293地喹氯銨(標準品)Dequalinium chloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人干細胞因子單*抗體細胞株;AMS2(SCF3)硫酸氫小檗堿(標準品)BERBERINE ACID SULFATE質(zhì)量規(guī)格:含量測定
CD6 Others Rat 大鼠 CD6 / TP120 人細胞裂解液 (陽性對照) 度米芬(標準品)Domiphen bromide質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
CM-H026人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸優(yōu)力司特;醋酸烏利司他Ulipristal acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
豚鼠肺細胞;GP-F1氟他胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Flutamide
CA14 Others Human 人 CA14 人細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)1酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水合物USP,BRCyclophosphamide
CL-0443SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2環(huán)1酰胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Cyclophosphamide
NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 人細胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,ARAmidopyrine/aminopyrine
大鼠角膜內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL緊張素II質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BRAngiotensin II
HCC827(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;CV-12,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline
人*癌細胞;AsPC-12,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline
MDA-MB-453 人癌細胞3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline
NCI-H1650人非小細胞細胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS5,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)5,5'-Thiodisalicylic Acid
人正常卵巢上皮細胞培養(yǎng)人間充質(zhì)干細胞-臍帶 Human鹽酸文拉法辛(標準品)Venlaine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
TPST1 Others Human 人 TPST1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸文拉法辛Venlaine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX質(zhì)量規(guī)格:>95%
BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸羅哌卡因(標準品)Ropivacaine mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
原代上皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml甲磺酸羅哌卡因Ropivacaine mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線