培養(yǎng)操作步驟：
人惡性細胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

資源名稱　人惡性細胞
種屬:U87 MG

類型:貼壁生長

形態(tài):CM1-1培養(yǎng)液中，貼壁，成纖維樣細胞，細長

分離基物:該細胞系由Ponten J等建立，源于惡性神經(jīng)。裸鼠皮下接種可成瘤。

提供形式:復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
JB6-C30細胞，小鼠皮膚細胞 J82(細胞) 犬腎細胞;MDCK/IgR苯并-15-冠5-(>98.0%(GC))Benzo-15-crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)苯并-12-冠4-(>98.0%(GC))Benzo-12-crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

CAL-27(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml苯并-18-冠6-(>96.0%(GC))Benzo-18-crown 6-Ether質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)

人骨骼肌成肌細胞HSkMM12-冠-4-(>95.0%(GC))12-Crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 15-冠-5-(>97.0%(GC))15-Crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
小耳豬肺細胞;SEP-L1丁香醛(>98%,BP)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BPSyringaldehyde

NRP2 Others Human 人 NRP2 / Neuropilin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 四氮唑紫(>98%,BS)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BSTetrazolium violet

CM-R092大鼠關節(jié)軟骨細胞完全培養(yǎng)基100mL1酸奧司他韋質(zhì)量規(guī)格：>98%Oseltamivir phosphate

ALPI Others Human 人 Alkaline Phosphatase / ALPI 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸奧司他韋(標準品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品Oseltamivir phosphate

小鼠軟骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地布卡因質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BRDibucaine HCl
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硅酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCSilicic acid hydrate

細胞名稱一氧化硅(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRSilicon monoxide

USP7 Others Human 人 USP7 / HAUSP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鎢硅酸(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSilicotungstic acid hydrate

SV-40轉(zhuǎn)化;WI38/VA13乙酸銀(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRSilver acetate

Ana-1細胞，鼠巨噬細胞 人肺鱗癌細胞,NCI-H520細胞 CL-0428RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Emodin-8-glucoside
人惡性細胞形態(tài)293XL-hTLR9人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR9 DMEM+10% Hyclone 滅活血清+10 μg/ml Blasticidin鹽酸依匹斯汀Epinastine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

BMP2 Protein Human 重組人 BMP-2 / BMP2A 蛋白鹽酸依匹斯汀(標準品)Epinastine HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,標準品

人滑膜細胞(HS)( 5×105 ) H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) Rattus依普利酮Eplerenone質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6依普利酮（標準品）Eplerenone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

人海馬趾神經(jīng)細胞(HN-h)(1×106)*度酸Etodolac質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
人惡性細胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。