資源名稱　人神經(jīng)細(xì)胞
種屬:U373

類型:貼壁生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細(xì)胞，短梭形

提供形式:復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計。

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)液，含谷氨酰胺。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
人神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
人神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯硫(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC）)Diphenyl sulfide質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC）

人主動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4,4'-二氨基二苯(ODA)(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4′-Diaminodiphenyl ether質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

S-180細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 THP-1(單核細(xì)胞) 人細(xì)胞;C-33A二十二烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

集落刺激因子4,4'-二氨基二苯硫(標(biāo)準(zhǔn)品)4,4'-Thiodianiline質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA血纖肽B，人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRFibrinopeptide B, human

GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 纖維結(jié)合素樣神經(jīng)肽；分裂FLRF酰胺質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRFMRF-like Neuropeptide;Schisto FLRF amide

CM-M045小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLG-R-G-D-T-P質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRG-R-G-D-T-P

TE-1細(xì)胞，人細(xì)胞 人細(xì)胞,SF17細(xì)胞 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3甘丙肽，豬質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRGalanin, porcine

Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2豆甾醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：95%,標(biāo)準(zhǔn)品,大豆來源Stigmasterol
DU 145 人細(xì)胞乙酰乙酸1公斤

SW480 [SW-480]人腺癌細(xì)胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS三氧化二;氧化;綠 ChroMic oxidq;ChroMq grqqn;Grqqn cinncbcr;cncdonis grqqn;ChroMiuM(III)oxidq 1308-38-9

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)1-基乙酸 1-acetic acid (≥95%, NAA) 86-87-3 25G 通用試劑

人羊膜上皮細(xì)胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基200張/盒RT

人癌細(xì)胞;MCF7(N'N二甲基酰胺)
人神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)IP6K1 Others Human 人 IHPK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 顏料綠 7Pigment Green 7質(zhì)量規(guī)格：

原代骨骼肌細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml酞菁(II)(>95.0%(T))Lead(II) Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 人肝上皮細(xì)胞，THLE-3細(xì)胞 EL4(瘤細(xì)胞)酞菁鋅(>95.0%(T)) Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29酞菁鐵(II)(>95.0%(T))Iron(II) Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

TGFBR1 Others Human 人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁二鈉Di Phthalocyanine質(zhì)量規(guī)格：