人角膜內皮細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

資源名稱　人角膜內皮細胞
種屬:HCEC-B4G12

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

生長特性:貼壁生長

存儲條件:50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

培養(yǎng)操作步驟：
人角膜內皮細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產品：
Acc-3細胞，涎腺腺樣囊性癌細胞 人細胞,BSG823細胞 犬胸腺細胞;cf2Th苯噻啶Pizotifen質量規(guī)格：美國進口

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3普伐他汀Pravastatin質量規(guī)格：美國進口

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-α-羥基普伐他汀內酯3α-Hydroxy Pravastatin Lactone質量規(guī)格：美國進口

人骨骼肌細胞HSkMC3-α-羥基普伐他汀鈉鹽3α-Hydroxy Pravastatin  Salt質量規(guī)格：美國進口

CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-3’’-羥基普伐他汀鈉鹽(S)-3’’-Hydroxy Pravastatin  Salt質量規(guī)格：美國進口
小鼠T細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)3,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸，塞羅寧質量規(guī)格：>97%,BR3,3',5'-Triiodo-L-thyronine

人脂肪細胞-內臟(HPA-v)(1×106 )Corylifol A(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98,標準品Corylifol A

CM-R088大鼠破骨細胞完全培養(yǎng)基100mL溴芬酸鈉質量規(guī)格：>98%,BRBromfenac

小鼠系;LA795 小鼠食管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL溴芬酸鈉(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥99,標準品Bromfenac

小鼠成纖維細胞(EGFP標記) Mouse對香豆酸;對羥基肉桂酸(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品p-Coumaric acid
CL-0431RT4(人膀胱移行細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2正戊100克RT，避光

人細胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL言醋錄普魯卡應 Chloroproccinq xy7nochloridq 3828-89-7

AtT20 小鼠細胞阿拉伯樹膠粉 Gum arabic from acacia tree 9000-1-5 100G 通用試劑

VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 肌動蛋白(廣譜)陽性對照片100克RT

人癌細胞;MDA-MB-435S(1,4-Dithioerythritol)
人角膜內皮細胞說明書CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2氧氟沙星N-氧化物醋酸鹽(非對映)Ofloxacin N-Oxide Acetic Acid Salt (Mixture of Diastereomers)質量規(guī)格：美國進口

HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞鹽酸阿巴卡韋Abacavir 質量規(guī)格：美國進口

EB病毒轉化的人B細胞;KM9803 人顱蓋造骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸阿巴卡韋Abacavir Sulfate質量規(guī)格：美國進口

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7阿巴卡韋羧化物Abacavir Carboxylate質量規(guī)格：美國進口

PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿巴卡韋5'-1酸鹽Abacavir 5'-Phosphate質量規(guī)格：美國進口
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線