培養(yǎng)操作步驟：
人食管腺癌細胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 

資源名稱　人食管腺癌細胞
種屬:OE33

類型:貼壁生長

形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮細胞樣，多角形，緊密排列

分離基物:源于一位73歲的白人女性

提供形式:凍存管/T25培養(yǎng)瓶

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約5min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)液，含谷氨酰胺。

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜移至液氮中保存。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
NCI-H1650細胞，人肺癌細胞 小鼠細胞,RM-1細胞 CM-R031大鼠腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL比卡魯胺（標準品）Bicalutamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

Raji(人Butt's瘤細胞) 5×106cells/瓶×2白消安Busulfan/Myleran質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,可用于細胞培養(yǎng)

Promocell C-28050 DC Generation Medium, 樹突狀細胞生成培養(yǎng)基(即用型) 250ml白消安（標準品）Busulfan/Myleran質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs)洛莫司汀Lomustine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

TNFRSF12A Others Human 人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 人細胞裂解液 (陽性對照) 洛莫司?。藴势罚?/span>Lomustine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
小鼠肺大動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL利多卡因(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定

C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2, Clone 8 mouse embryonic fibroblast MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鹽酸利多卡因質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR HCl

IL1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白鹽酸利多卡因(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定 HCl

NCI-H520(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 T/G HA-VSMC(人主動脈平滑肌細胞)L-胱氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Cystine

CL-0342H4-II-E-C3(大鼠細胞 )5×106cells/瓶×2L-半胱氨酸質(zhì)量規(guī)格：含量98~101%,BRL-Cysteine
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6 II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL9-芴酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)9-Fluorenone

Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細胞 Human9-芴醇(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)9-Fluorenol

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-芴(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)2-Fluorenecarboxaldehyde

人小腦顆粒細胞總RNAHCGC NA2-羥基-9-芴酮(>90.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)(T)2-Hydroxy-9-fluorenone

PARP3 Others Human 人 PARP-3 / PARP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二溴蒽醌(>95.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)2,6-Dibromoanthraquinone
人食管腺癌細胞形態(tài)中國倉鼠肺細胞;CHL 細胞，NIH:OVCAR-3細胞 L8824細胞，草魚*細胞氧化硒(>98%,Pract Grade)Selenium (IV) oxide質(zhì)量規(guī)格：>98%,Pract Grade

人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1芝麻酚(>98%,BC)Sesamol質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 粗孔柱層析硅膠(20-60目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格：20-60目,層析用

真皮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)粗孔柱層析硅膠(100-200目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格：100-200目,層析用

EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 粗孔柱層析硅膠(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格：300-400目,層析用
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
人食管腺癌細胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。