培養(yǎng)操作步驟：
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

資源名稱　EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞
種屬:KMY1022

分離基物:B淋巴細(xì)胞；EBV轉(zhuǎn)化

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
Sf-21(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2草酸銅(>97%,Tech Grade)Copper(II) oxalate hydrate質(zhì)量規(guī)格：>97%,工業(yè)級(jí)

Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem e,liquid 75ml無(wú)水硫酸銅(>99%,BR)Copper(II) sulfate, anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-sp cDNA肌1;肌酐Creatinine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SCGB1A1 Others Human 人 SCGB1A1 / Uteroglobin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酸性猩紅7B(>70%,BS)Crocein scarlet 7B質(zhì)量規(guī)格：>70%,BS

ACTE1 非洲爪蟾胚胎細(xì)胞酸性紅44(BS)Crystal ponceau 6R質(zhì)量規(guī)格：BS
小鼠前細(xì)胞;MFC己二酸二丙酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Dipropyl Adipate

CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 壬二酸二甲酯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Dimethyl Azelate

CM-R114大鼠視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL己二酸雙(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)Bis(2-butoxyethyl) Adipate

KYSE70細(xì)胞，人食管鱗癌 神經(jīng)細(xì)胞,SHG-44細(xì)胞 豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2油酸乙酯(>70.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(GC)Ethyl Oleate

CFPAC-1(人*癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2己二酸二乙酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Diethyl Adipate
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL地紅霉素，英文名或英文縮寫：LY-237216，級(jí)別：BR，規(guī)格：5KU

A3人T細(xì)胞細(xì)胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS氘代本并(A) BqNZO(c)cNTHRcCqNq D12 1718-23-

FGF1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白甜菜素，英文名或英文縮寫：Betaine，級(jí)別：USP級(jí)，98%，規(guī)格：25毫克

B16-F1(小鼠色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA3-[(N-三(羥甲基)甲基]-2-羥基丙磺酸，英文名或英文縮寫：TAPSO，級(jí)別：IND，50%，規(guī)格：100克

人cDNAHPF cDNAMaltExtractBroth 500g原裝 BD 211320/Oxoid
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標(biāo)簽)乙酸鈉三水(分子生物學(xué)級(jí)) acetate, trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

人骨骼肌成肌細(xì)胞(HSkMM)(5×105) 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Mouse脫葉靈,噻苯隆Thidiazuron質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79(AR)Iodine質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙醇脫氫酶ADA, Alcohol dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格：>300U/mg,BR

CL-0045C-33 A(人子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2吐溫80(化學(xué))Tween-80質(zhì)量規(guī)格：CP
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。