人心肌細胞形態(tài)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人心肌細胞形態(tài)
種屬:AC16

類型:貼壁生長

分離基物:人,心肌

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:H-DMEM，90%；FBS，10%；雙抗

傳代方法:1:2 to 1:4 Medium renewal: 2 times per week

生長條件:Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存儲條件:Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8% Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人心肌細胞形態(tài)的相關熱銷產(chǎn)品：
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），人ACTH(1-39),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

恒河猴腎細胞;LLC-MK2促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），大鼠ACTH (1-39), rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

NCI-H838細胞，人非小細胞細胞 大鼠正常肝細胞,BRL-3A細胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL促腎上腺皮質(zhì)激素（18-39），人ACTH (18-39), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞細胞) 5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素（4-10），人ACTH (4-10), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml*髓質(zhì)肽（22-52），人Adrenomedullin (22-52),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
小型豬腎細胞;MPK草酸鈦鉀二水(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCPotassium titanyl oxalate ,dehydrate

CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 對苯二(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRp-Phthaldehyde

神經(jīng)小膠質(zhì)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)丙基紅(>80%,Ind Grade)質(zhì)量規(guī)格：>80%,Ind GradePropyl red

鯉魚尾鰭細胞;YZ16 人皮膚基底細胞癌，TE 354.T細胞 Acc-2(涎腺腺樣囊性癌細胞)吡唑(>質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRPyrazole

人急性單核細胞細胞;THP-1靈芝1酸B質(zhì)量規(guī)格：HPLC>90%Ganoderenic acid B
CL-0388NCI-H157(人非小細胞)5×106cells/瓶×2蘋果酸鈉500克

C2C12, 小鼠肌原細胞 人細胞，DU145細胞 SK-MES-1(人細胞)3-乙酰脫氧瓜萎鐮菌醇 3-Acetyldeoxynivalenol,98% 50722-38-8 1MG 通用試劑

人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7L-天冬酰安;L-天冬減;L-天冬速;L-酰安天冬醋;L-天門冬酰安;L-2-安基琥珀醋酰安 L-cspcrcginq;L-β-cspcrcginq;L-cMinosuccincMic ccid;L-cspcrtic ccid β-MonocMidq;β-cMidq of cspcrtic ccid 70-47-3

CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細胞裂解液 (陽性對照) metxylEosin甲基曙紅紅色粉末RTsigma

人肝星形細胞RNAHHSteC miRNA5 μg491-35-04-甲基;勒披丁;勒匹丁;γ-甲基;4-甲基氮雜4-metxylinoneoline;γ- metxylinoneoline;Cincholepidine
人心肌細胞形態(tài)OSMR Others Mouse 小鼠 OSMR / IL-31RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 陰丹酮Indanthrone質(zhì)量規(guī)格：

KB 人口腔上皮癌細胞久洛尼定(>97.0%(GC)(T))Julolidine質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)

MDA-MB-415人腺癌細胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+15%FBS9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC))9-Julolidinecarboxaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標簽)9,10-菲醌(>99.0%(GC))9,10-Phenanthrenequinone質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)

小鼠少突膠質(zhì)前體細胞(MOPC)(5×105) Hep-2, 人細胞系 Human菲啶(>98.0%(GC))Phenanthridine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
收到人心肌細胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。