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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3286 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形,成簇生長 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 懸浮生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤培養(yǎng) | 懸浮生長 | CSX3286 |
資源名稱 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤
種屬:Y79
形態(tài):圓形,成簇生長
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)20%FBS
傳代方法:1:2~1:4傳代,每周2次換液。
生長特性:懸浮生長
存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
培養(yǎng)操作步驟:
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤培養(yǎng)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
人間充質(zhì)干細(xì)胞-*裂解物HMSC-hp L超細(xì)高嶺土(6000(3.5um))Kaolin(superfine)質(zhì)量規(guī)格:6000(3.5um)
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 高嶺土(醫(yī)藥級)Kaolin質(zhì)量規(guī)格:醫(yī)藥級
正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3硅藻土G(TLC專用)Kieselguhr G質(zhì)量規(guī)格:TLC專用
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL硅膠(AR)Silica gel質(zhì)量規(guī)格:AR
EC109,人細(xì)胞 Human二氧化硅(99.99%,1-3mm)Silicon dioxide質(zhì)量規(guī)格:99.99%,1-3mm
小鼠外周血白細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL二茂鐵乙酸(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)Ferroceneacetic Acid
MFC小鼠細(xì)胞 MFC mouse gasic cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記)質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記(Hydrazinocarbonyl)ferrocene
IL36RN Protein Human 重組人 IL1F5 / IL36RN 蛋白二甲亞砜(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)Dimethyl Sulfoxide
QG-56(人肺扁平上皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L-02(正常肝細(xì)胞)1,2,3,4-四氫萘(>98.0%(GC)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene
CL-0220STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×27-羥基-3-羧酸(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid
NCI-H23細(xì)胞,人非小細(xì)胞細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3NIH細(xì)胞 CM-R087大鼠軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL5-扶乳清酸shēng huà shì jì容量:500毫克
RKO(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2水解酪蛋柏瓊脂; M-H瓊脂 Ccsqin xy7nolysctq cgcr; Muqllqr-Hinton cgcr;
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml尿嘧啶 Uracil (≥99%, cell culture tested) 66-22-8 25G 核酸衍生物
人腎系膜細(xì)胞cDNAHRMC cDNA2′-脫氧胞苷-5′-單嶙酸shēng huà shì jì容量:RT25克
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Foline-pxenol 50ml/100ml/250ml Sigma F9252
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤培養(yǎng)中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系*);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr異佛手柑內(nèi)酯Isobergapten質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RGMA Others Human 人 RGMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isoliquiritin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
A375 人惡性色素瘤細(xì)胞雷馬曲班Ramatroban;BAY u3405質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦細(xì)胞 C6-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+2ug/ml puromycin異鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Isorhynchophylline質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RSPO2 Protein Human 重組人 FTLS / RSPO2 蛋白 (186 Leu/Pro, Fc 標(biāo)簽)異葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)luteolin-6-C-glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線