細胞培養(yǎng)過程：

冷凍保存細胞之方法：
人T細胞細胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人T細胞細胞
種屬:SNK6 NK/T

類型:懸浮生長

分離基物:NK/T細胞；男性

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級:2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到人T細胞細胞 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人T細胞細胞 的相關熱銷產(chǎn)品：
Hep 3B(人細胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27，人，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質量規(guī)格：>95%,BR

AGRP Others Human 人 AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27（6-27），人，雞，小鼠，豬，大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質量規(guī)格：>95%,BR

人角膜上皮細胞HCEpiC垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38（16-38），人，雞，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質量規(guī)格：>95%,BR

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關肽（1-29），大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質量規(guī)格：>95%,BR

HMy2.CIR 人 B 母細胞胰多肽，人Pancreatic Polypeptide,human質量規(guī)格：>95%,BR
小鼠周神經(jīng)成纖維細胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細胞 Human氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC))質量規(guī)格：>97.0%(GC)Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate

中國倉鼠肺細胞;CHL4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N))質量規(guī)格：>96.0%(N)4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene

人髓核細胞(HNPC)(5×105)4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))質量規(guī)格：>95.0%(N)4,4'-Diamyloxyazoxybenzene

CL-0083FaDu(人咽鱗癌細胞)5×106cells/瓶×24,4'-二丁氧基氧化偶氮苯質量規(guī)格：4,4'-Dibutoxyazoxybenzene

小鼠細胞;GT1-1 大鼠角膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL水楊酸（標準品）質量規(guī)格：含量測定Salicylic acid
CD93 Others Human 人 CD93 / C1QR1 人細胞裂解液 (陽性對照) PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑超級白色粉末COLDsigma

MS751 人子宮頸表皮癌細胞3-羌基炳晴puriss》99.0% 3-xy7noxypropionitnilq 109-78-4

NCI-H661人大細胞細胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSpxenOLPHTHALEIN酚酞白色至米白色固體RTsigma

AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標簽)PROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技術級液體FROZENsigma

人胚肺二倍體細胞;2BS 人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL9004-34-6微晶纖維素Microcrystalline Cellulose (AS)
人T細胞細胞 NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2抑霉唑（標準品） Imazalil質量規(guī)格：分析標準品

CNE(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜堿性細胞)5×106cells/瓶×2 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7春雷霉素鹽酸鹽（標準品）Kasugamycin 質量規(guī)格：分析標準品,≥90% (HPLC)

中國倉鼠卵巢細胞(亞系*);CHO-HCV-E2標準溶液（10μg/ml,u=4%）Kitazine solution質量規(guī)格：10μg/ml,u=4%

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 利谷?。藴势罚?/span> Linuron質量規(guī)格：分析標準品

滑膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)苯噻草胺（標準品）Mefenacet質量規(guī)格：分析標準品,98.5%