小鼠海馬神經元細胞系培養(yǎng)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　小鼠海馬神經元細胞系培養(yǎng)
種屬:HT22

類型:貼壁生長

形態(tài):神經元細胞樣

分離基物:小鼠，海馬

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%DMEM+ 10%FBS

傳代方法:傳代比例建議1:2-1:6.

生長條件:37攝氏度，5%二氧化碳，95%空氣

存儲條件:90%FBS+10%DMSO
細胞分類：
第一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是小鼠海馬神經元細胞系培養(yǎng)的相關熱銷產品：
人小腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL達托霉素Daptomycin質量規(guī)格：≥930μg/mg,BR,可用于細胞培養(yǎng)

P388細胞，小鼠細胞 空腸彎曲桿菌 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1達托霉素(標準品)Daptomycin質量規(guī)格：效價測定

CCL20 Protein Mouse 重組小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標簽)鹽酸柔紅霉素Daunorubicin HCl質量規(guī)格：度大于97%含量84.0-102%,USP30

P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸柔紅霉素(標準品)Daunorubicin HCl質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]鹽酸柔紅霉素(進口)Daunorubicin HCl質量規(guī)格：USP,進分sigmaD8809
原代軟骨細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1mlN-去羥乙基達沙替尼-d8質量規(guī)格：美國進口N-Deshydroxyethyl Dasatinib

FCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 4'-羥基達沙替尼質量規(guī)格：美國進口4'-Hydroxy Dasatinib

中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-2414-氯柔紅霉素質量規(guī)格：美國進口14-Chloro Daunorubicin

HLF-02細胞，人胚肺二倍體細胞 大鼠肝星形細胞,CFSC-3H & 5H細胞 CM-M120小鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL多1紫杉醇代謝物M4質量規(guī)格：美國進口Docetaxel Metabolite M4

SK-Hep-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2羥基脫氫硝苯地平羧酸鹽質量規(guī)格：美國進口Hydroxydehydro Nifedipine Carboxylate
KMB 人胚肺成纖維樣細胞1,1-環(huán)丁基二酸，英文名或英文縮寫：1,1-Cyclobutanedicarboxylic acid，級別：AR，99%，規(guī)格：5克

CM-H091人大隱內皮細胞完全培養(yǎng)基100mL磺醋銨 cmmonium sulfcmctq 7773-06-0

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤D-天門冬酸，英文名或英文縮寫：D-Aspartic acid dimetxyl ester xy7nochloride，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網膜微內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL雙岐桿菌BS培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100毫升

人平滑肌細胞總RNAHCSMC NA(2-(環(huán)已胺)-1-乙磺酸)
小鼠海馬神經元細胞系培養(yǎng)角膜內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil質量規(guī)格：Viscosity Grade 100

小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記) 人，SW 1271[SW-1271;SW1271]細胞 LLC Lewis(細胞)優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil質量規(guī)格：Viscosity Grade 150

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17紫尿酸 一水合物(97%)Violuric acid monohydrate質量規(guī)格：0.97

TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 生育酚乙酸酯(標準品)Vitamin E acetate質量規(guī)格：分析標準品

中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I1效唑(分析標準品97.5%)Uniconazole質量規(guī)格：分析標準品97.5%
收到小鼠海馬神經元細胞系培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。