人瘤細胞 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人瘤細胞
種屬:SK-UT-1

類型:貼壁生長

形態(tài):上皮細胞樣

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級:2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人瘤細胞 的相關熱銷產(chǎn)品：
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8低粘度羥丙基纖維素HPC, hydroxypropyl cellulose質量規(guī)格：150~400 mpa.s,BR

Bel-7404細胞，人細胞 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CHOL(+)1酸二鈉二水(>98%,BC )L(+) tartrate dihydrate質量規(guī)格：>98%,BC

L1210(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸吡哆胺(>98%,BC )Pyridoxamine, di質量規(guī)格：>98%,BC

Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Differe. Medium, 間充質干細胞軟骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml水楊酸鈉(>99%,USP) salicylate質量規(guī)格：>99%,USP

人成纖維細胞總RNAHLF NA3-(環(huán)己氨基 )-1-丙磺酸鈉(分子生物學級)CAPS,  salt質量規(guī)格：>99%,分子生物學級
中國倉鼠卵巢細胞;CHO輔酶Q9質量規(guī)格：>99%CoenzymeQ9

F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) 輔酶Q9(標準品)質量規(guī)格：>99%,標準品CoenzymeQ9

A172 人膠質母細胞瘤細胞利可君（標準品）質量規(guī)格：含量測定Leucoson

MCF-7-EGFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)人癌細胞 MCF-7-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human breast cancer cells 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin拉米夫定（標準品）質量規(guī)格：含量測定Lamivudine

RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白托拉塞米（標準品）質量規(guī)格：HPLC法含量測定Torasemide
A9 小鼠皮下結締組織細胞鹽培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克

CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞)5×106cells/瓶×22-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8

mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞扶化鋁鉀，英文名或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級別：BR，97%，規(guī)格：100克

Sars結構蛋白表達株;293 001A 人腎實質細胞完全培養(yǎng)基 100mL維生素D2shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

人周細胞總RNAHBVC NA94-98-42，4-二甲基芐胺2,4-Dimetxylbenzylamine
人瘤細胞 中國倉鼠肺細胞;V79知母皂苷BII（標準品）Timosaponin BII質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

H1299細胞，人 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞 CM-M058小鼠膀胱上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2',3'-二脫氧鳥苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine質量規(guī)格：>97%,進分

SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2知母皂苷E(標準品)Anemarsaponin E質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

NHEK-c 正常人表皮角質形成細胞(NHEK)，混合 500,000cells 原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml植酸(標準品)Phytic acid質量規(guī)格：UV≥98%，標準品

豬源細胞重樓皂苷I（標準品）Polyphyllin I質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
收到人瘤細胞 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。