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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CP934848 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
錐蟲通用探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 | Trypanosoma spp. | CP934848 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒可用于檢測(cè)食品或其他材料中是否有的成分?,F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對(duì)食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測(cè)的快速靈敏的食材來源檢測(cè)技術(shù)將對(duì)食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品,它具有下列特點(diǎn):
1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。
2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物,能專一性檢測(cè)出樣品中的大豆成分,但不能檢測(cè)其他非大豆成分。
3. 快速,整個(gè)檢測(cè)過程(按一個(gè)樣品計(jì))所需時(shí)間僅為 2.0 小時(shí)。
4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設(shè)備。
5. 對(duì)混合樣品中大豆成分的檢測(cè)下限為 0.1%,對(duì)樣品中大豆成分的核酸檢測(cè)下限為 1.0ng/μL。
6. 本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。
PCR反應(yīng)五要素:
產(chǎn)品僅供科研使用參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子*很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
產(chǎn)品特征:
錐蟲通用探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒靈敏度高:能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。產(chǎn)品僅供科研使用
總堿度測(cè)定試劑盒 Total alkalinity determination kit Rebeprazole 中文名:雷貝拉唑鈉 分子式:C18H20N3NaO3S 度:98.0%
總基酸(T-AA)檢測(cè) Hydroxyproline sample preeatme Androstadienedione 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2
總基酸(T-AA)測(cè)試盒 The total amino acid (TAA) test kit Rengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4 度:98.0%
總合成酶(NOS)測(cè)試盒[測(cè)總NOS(T-NOS)] Raltegravir 中文名:雷特格韋 分子式:C20H21FN6O5 度:98.0%
總合成酶(NOS)測(cè)試盒[測(cè)總NOS(T-NOS)] Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 2099-26-5 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4
Rifampicin 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12 植物血凝素 5mg
Ribavirin 中文名:利巴韋林 分子式:C8H12N4O5 Lectin,fromArachisHypogaea(pean)
Rhein 中文名:大黃酸 分子式:C15H8O6 植物血凝素 5mg
Retigabine 中文名:瑞替加濱 分子式:C16H18FN3O2 Lectin,fromiticumvulgaris
Repaglinide ethyl ester 中文名: 分子式:C29H40N2O4 植物血凝素(PHA)ELISAKit
Tebipenem pivoxil 中文名:泰比培南酯 分子式:C22H31N3O6S2 醇脫氫酶(ADH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Tazobactam acid 中文名:他唑巴坦酸 分子式:C10H12N4O5S 脂氧合酶(LOX)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Taxilluside A 中文名: 分子式:C18H24O10 ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒 可見分光光度法 10管/9樣
Tauroursodeoxycholic acid 中文名:?;切苋パ跄懰?/span> 分子式:C26H45NO6S 脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN
Taurocholic acid 中文名:牛磺膽酸 分子式:C26H45NO7S 脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN
錐蟲通用探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate) 177602-14-1 中文名: 分子式:C29H58O5 HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2-C-Methyl-D-erythritol 58698-37-6 中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇 分子式:C5H12O4 HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 129141-48-6 中文名: 分子式:C8H16O4 組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次(10樣本)
Linderaspirone A 1235126-46-1 中文名: 分子式:C34H32O10 HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 124111-47-3 中文名: 分子式:C26H52O3 兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
使用方法:
一、錐蟲通用探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。